| 英文缩写词表 | 第1-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章:文献回顾 | 第11-29页 |
| 一、HER 家族概述 | 第11-13页 |
| 二、HER2 的研究现状 | 第13-21页 |
| (一) HER2的基因结构与蛋白质组成 | 第13页 |
| (二) HER2的转录调控基因 | 第13页 |
| (三) 与HER2基因转录调控有关的转录因子 | 第13-14页 |
| (四) HER2的信号转导 | 第14-15页 |
| (五) HER2/ neu 与乳腺癌及其他肿瘤的发生、发展 | 第15-16页 |
| (六) HER2与乳腺癌预后 | 第16-17页 |
| (七) 靶向HER2的药物研究进展 | 第17-21页 |
| 三、热休克蛋白的研究现状 | 第21-29页 |
| (一) HSP的分类 | 第21页 |
| (二) HSP的基因特点 | 第21-22页 |
| (三) HSP的转录 | 第22页 |
| (四) HSP的翻译 | 第22-23页 |
| (五) HSP的生物学功能 | 第23-29页 |
| 第二章:材料和方法 | 第29-48页 |
| 一、实验材料 | 第29-31页 |
| (一) 限制性内切酶及有关试剂 | 第29页 |
| (二) 质粒与菌株 | 第29页 |
| (三) 细胞株及有关试剂和实验动物 | 第29页 |
| (四) 引物的合成及肽的合成 | 第29-30页 |
| (五) 培养基 | 第30页 |
| (六) 抗体,荧光抗体及细胞染色相关试剂 | 第30页 |
| (七) 流式细胞仪 | 第30-31页 |
| 二、主要方法 | 第31-48页 |
| (一) 采用 PCR 法合成特异性基因/DNA 片段 | 第31-32页 |
| (二) 构建pMD-18T-HER2 质粒 | 第32-33页 |
| (三) 目的质粒的构建 | 第33-34页 |
| (四) 细胞转染及鉴定 | 第34-35页 |
| (五) HSP65-HER2 融合蛋白的表达、鉴定、纯化 | 第35-39页 |
| (六) 小鼠体外细胞毒T 淋巴细胞活性测定 | 第39-40页 |
| (七) 人外周血单个核细胞(PBMC)的分离 | 第40-41页 |
| (八) HSP65-HER2 及HSP65 融合蛋白对人PBMC 的影响 | 第41页 |
| (九) 人树突状细胞(DC)的诱导 | 第41-42页 |
| (十) HSP65-HER2 对 HER2 特异性CD8~+T 细胞的诱生 | 第42-43页 |
| (十一) 用 DIMER 染色法检测表位特异性的 CTL | 第43页 |
| (十二) 人体外抑瘤实验 | 第43-44页 |
| (十三) 细胞内染色法检测 IFN-γ的分泌 | 第44-45页 |
| (十四) 细胞凋亡的检测 | 第45页 |
| (十五) FATAL法进行杀伤实验 | 第45-48页 |
| 第三章:实验结果 | 第48-74页 |
| 一、HSP65-HER2 重组蛋白的构建、表达和纯化 | 第48-49页 |
| (一) HER2 多表位融合蛋白基因片段的合成 | 第48页 |
| (二) pET28a-HSP65-HER2 重组质粒的构建 | 第48页 |
| (三) HSP65-HER2 重组蛋白的获得 | 第48-49页 |
| 二、HSP65-HER2生物学功能的研究 | 第49-56页 |
| (一) HSP65-HER2 重组蛋白的体外抑瘤效应 | 第49-51页 |
| (二) HSP65-HER2重组蛋白的抑瘤机理 | 第51-54页 |
| (三) HSP65-HER2 作用于小鼠 HER2 阳性肿瘤细胞的初步研究 | 第54-56页 |
| 图和照片 | 第56-74页 |
| 第四章:讨论 | 第74-86页 |
| 一:HSP65-HER2融合蛋白中HER2表位肽的选取 | 第74-78页 |
| (一) HER2 CTL表位肽的选取 | 第74-76页 |
| (二) HER2 TH表位肽的选取 | 第76-77页 |
| (三) HER2 B 细胞表位肽的选取 | 第77-78页 |
| 二:FATAL 法检测CTL 或NK 细胞的杀伤活性 | 第78-79页 |
| 三:HSP65-HER2 诱导杀伤HER2 高表达肿瘤细胞机制的研究 | 第79-86页 |
| (一) HSP65-HER2 能够激活机体的特异性免疫系统 | 第79-83页 |
| (二) HSP65-HER2 能够激活机体的非特异性免疫系统 | 第83-86页 |
| 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-99页 |
| 攻读博士期间发表论文情况 | 第99-100页 |
| 中文摘要 | 第100-108页 |
| ABSTRACT | 第108-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
