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与棉纤维发育相关的四个基因的克隆、表达特性与定位

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
第一部分 文献综述第12-23页
 1 概述第12页
 2 棉纤维的分化和发育第12-20页
   ·纤维原始细胞分化和突起第13-14页
   ·棉花纤维伸长的分子机制第14-19页
     ·渗透压与棉花纤维的伸长第15-17页
     ·细胞壁松弛与棉花纤维伸长第17页
     ·微管束蛋白与棉花纤维伸长及细胞质骨架组织化有关的基因表达第17-18页
     ·与细胞壁生长有关的基因表达第18-19页
   ·棉花纤维次生壁形成的分子机制第19-20页
     ·纤维素合成酶复合体的结构第19-20页
   ·棉花纤维成熟的分子机制第20页
 3 本研究的目的和意义第20-23页
第二部分 研究报告第23-68页
 1 引言第23页
 2 实验材料和方法第23-37页
   ·实验材料第23-26页
     ·植物材料第23-24页
     ·菌种和质粒第24页
     ·基因来源第24页
     ·试剂第24页
     ·引物合成第24页
     ·序列分析所涉及的数据库与软件程序第24-26页
   ·实验方法第26-37页
     ·棉花RNA的提取第26-28页
       ·改进的热硼酸法(提取除叶片外的棉花各组织)第26-28页
         ·准备工作:第26页
         ·试剂的配制:第26-27页
         ·仪器:第27页
         ·实验步骤:第27-28页
       ·CTAB法提取总RNA(用于棉花叶片的总RNA的提取)第28页
     ·甲醛-琼脂糖凝胶电泳第28-30页
       ·准备工作第28-29页
       ·实验步骤第29-30页
         ·制备1.2%FA Gel第29页
         ·RNA样品的处理第29页
         ·电泳条件第29-30页
     ·RT-PCR第30-31页
       ·DNA的消化第30页
       ·cDNA第一链的合成第30页
       ·RT-PCR第30-31页
     ·Sourthern blotting第31-35页
       ·CTAB法提取棉花基因组DNA第31-33页
       ·确定DNA浓度第33页
       ·基因组DNA的酶切第33页
       ·酶切结果的电泳检测第33页
       ·酶切产物的纯化第33页
       ·电泳第33页
       ·洗胶第33-34页
       ·搭桥转膜第34页
       ·烘膜第34页
       ·探针的DIG标记第34页
       ·杂交第34-35页
       ·洗膜与显色第35页
       ·试剂及其配制第35页
     ·定位第35-37页
 3 结果与分析第37-68页
   ·GhCHS的cDNA克隆与表达特性研究第37-43页
     ·GhCHS全长的获得第37-39页
     ·GhCHS序列分析第39-41页
     ·GhCHS的RT-PCR分析第41-42页
     ·GhCHS的Southern杂交分析第42页
     ·GhCHS基因的染色体定位第42-43页
   ·GhSAMS cDNA克隆、表达特性及定位研究第43-51页
     ·GhSAMS全长的获得第43-45页
     ·GhSAMS序列分析第45-47页
     ·GhSAMS的RT-PCR分析第47-49页
     ·GhSAMS的Southern杂交分析第49页
     ·GhSAMS基因的染色体定位第49-51页
   ·GhNLP cDNA克隆、表达特性及定位研究第51-58页
     ·GhNLP全长的获得第51-52页
     ·GhNLP序列分析第52-55页
     ·GhNLP的RT-PCR分析第55-56页
     ·GhNLP的Southern杂交分析第56-57页
     ·GhNLP基因的染色体定位第57-58页
   ·GhCPI的cDNA克隆与表达特性研究第58-68页
     ·GhCPI全长的获得第58-59页
     ·GhCPI序列与其他相关序列的同源性分析第59-64页
     ·GhCPI序列分析第64-66页
     ·GhCPI的RT-PCR分析第66-67页
     ·GhCPI的Southern杂交分析第67页
     ·GhCPI基因的染色体定位第67-68页
4 讨论第68-83页
   ·基因芯片的优势及在植物基因组研究中的应用第68-69页
   ·查尔酮合成酶在生物体中以及棉纤维发育中的可能功能分析第69-74页
   ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶在生物体及棉纤维发育中的可能功能分析第74-78页
   ·结瘤素在生物体中的可能功能分析第78-79页
   ·半胱氨酸蛋白酶抑制剂在生物体中的可能功能及应用分析第79-83页
全文结论第83-84页
参考文献第84-94页
致谢第94页

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