英文缩略表 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
英文摘要 | 第13-15页 |
引言 | 第15-31页 |
1 禽网状内皮组织增殖病病毒的研究进展 | 第15-20页 |
2 REV 引起的感染和免疫抑制对鸡群的危害 | 第20-21页 |
3 禽痘病毒简要研究进展 | 第21-27页 |
4 禽痘病毒与禽网状内皮组织增殖症病毒基因整合的研究进展 | 第27-30页 |
5 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
研究内容 | 第31-67页 |
试验一 REV 基因片段整合进FPV 疫苗和野毒株的检测 | 第31-42页 |
1 材料和方法 | 第32-37页 |
·毒株和细胞 | 第32页 |
·材料和试剂 | 第32页 |
·疫苗病毒在CEF 中的传代和DNA 的提取 | 第32页 |
·野毒株病毒在CEF 中的传代和DNA 的提取 | 第32-33页 |
·LTR 和env 基因探针的标记及对样品的检测 | 第33-35页 |
·REV-LTR,REV-env,REV-pol,REV-gag 的PCR 扩增及序列分析 | 第35-37页 |
·禽痘疫苗株及禽痘病毒野毒株中传染性REV 的检测 | 第37页 |
2 结果 | 第37-39页 |
·FPV 疫苗株和野毒株的Dot-blot 检测结果 | 第37-38页 |
·FPV 野毒株和疫苗株REV 基因组的PCR 检测 | 第38-39页 |
·FPV 野毒株感染鸡胚尿囊液和FPV 疫苗产品中传染性REV 的检测 | 第39页 |
3 讨论 | 第39-42页 |
试验二 REV 长末端重复序列LTR 在FPV 疫苗株中整合区的克隆与序列比较 | 第42-52页 |
1. 材料和方法 | 第43-44页 |
·材料和试剂 | 第43页 |
·引物合成 | 第43页 |
·PCR 用DNA 模板的制备 | 第43页 |
·PCR 扩增FPV-REV LTR 的整合区 | 第43页 |
·重组质粒的构建及阳性克隆筛选鉴定 | 第43-44页 |
·FPV-REV LTR 整合区序列测定与比较分析 | 第44页 |
2. 结果 | 第44-50页 |
·FPV-REV LTR 整合区PCR 扩增结果 | 第44页 |
·阳性克隆双酶切结果 | 第44页 |
·FPV-REV LTR 整合区的测序结果与比较分析 | 第44-50页 |
3 结论 | 第50-52页 |
试验三 一株整合有禽网状内皮组织增殖症病毒基因组的禽痘病毒的发现 | 第52-67页 |
1 材料及方法 | 第53-56页 |
·材料和试剂 | 第53页 |
·FPV 野毒株的分离鉴定 | 第53页 |
·鸡痘病毒DNA 提取 | 第53页 |
·间接荧光抗体实验(IFA)检测REV 游离病毒 | 第53-54页 |
·探针标记及斑点分子杂交试验 | 第54页 |
·FPV 中REV 的基因片段的扩增和序列分析 | 第54-56页 |
·LY-1 株的 REV 和FPV 整合区相关序列的扩增和序列分析 | 第56页 |
·田间分离株LY-1 的人工致病试验 | 第56页 |
2 结果 | 第56-59页 |
·斑点分子杂交试验(Dot-blot)检测结果 | 第56-57页 |
·REV 游离病毒IFA 检测结果 | 第57页 |
·FPV 中REV 不同基因片段的PCR 扩增及序列分析 | 第57-58页 |
·FPV LY-1 株和 REV 整合片段的 PCR 扩增和相关片段的克隆测序与序列分析 | 第58-59页 |
·人工致病试验结果 | 第59页 |
3 讨论 | 第59-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
附录1(FPV-C-REV 与SNV 株、FA 株全序列比较) | 第79-97页 |
附录2 | 第97页 |