| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 多不饱和脂肪酸的功能及其基因工程研究进展 | 第11-21页 |
| ·Ω-3 和Ω-6 多不饱和脂肪酸的生理功能 | 第11-13页 |
| ·Ω－3PUFAS 在药用价值方面的研究进展 | 第13-15页 |
| ·多不饱和脂肪酸与大脑的发育和功能维持 | 第15-16页 |
| ·Ω-6 和Ω-3PUFAS 的生物合成 | 第16-19页 |
| ·PUFAS 的基因工程合成的研究进展 | 第19-20页 |
| ·前景与展望 | 第20-21页 |
| 第二章 应用慢病毒载体法制备转基因动物的研究进展 | 第21-27页 |
| ·慢病毒及慢病毒转基因载体系统 | 第21-24页 |
| ·慢病毒载体法用于动物转基因的实践 | 第24-26页 |
| ·存在的问题和改进对策 | 第26-27页 |
| 第三章 SFAT-1 基因的人工合成 | 第27-35页 |
| ·材料与方法 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·sFat-1 基因的人工合成设计 | 第27页 |
| ·寡核苷酸片段的合成 | 第27-28页 |
| ·寡核苷酸片段的PCR 法拼接与酶切连接 | 第28页 |
| ·全长基因的克隆及序列分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·密码子优化及二级结构预测 | 第28-30页 |
| ·sFat-1 基因的人工合成和PCR 拼接 | 第30-31页 |
| ·合成sFat-1 基因克隆及验证 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 SFAT-1 基因在哺乳动物细胞系的表达和功能研究 | 第35-45页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·哺乳动物细胞系表达载体的构建 | 第35页 |
| ·细胞培养与传代及冻存 | 第35-36页 |
| ·阳离子脂质体法转染CHO 细胞 | 第36页 |
| ·RT-PCR 初步鉴定 | 第36-37页 |
| ·脂肪酸的分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·带有表达EGFP 的表达质粒pcDAN3.1-sFat-1-EGFP 的构建 | 第37-39页 |
| ·pcDAN3.1-sFat1-EGFP 在CHO 细胞系的表达 | 第39-40页 |
| ·sFat1 基因的表达及其对CHO 细胞脂肪酸组成的影响 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 显微注射法制备转基因小鼠 | 第45-68页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·质粒构建 | 第45页 |
| ·显微注射 | 第45-47页 |
| ·小鼠基因组DNA 的制备 | 第47页 |
| ·转基因小鼠的PCR 鉴定 | 第47-48页 |
| ·转基因小鼠的Soutrern blot 鉴定 | 第48-50页 |
| ·首建者转基因小鼠的传代 | 第50页 |
| ·RT-PCR 检测转基因小鼠在不同组织器官的表达情况 | 第50页 |
| ·转基因小鼠中sFat-1 基因表达即脂肪酸组成变化的鉴定 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-63页 |
| ·质粒pBC1-sFat1 的构建 | 第50页 |
| ·显微注射 | 第50-52页 |
| ·转基因小鼠的PCR 检测 | 第52-53页 |
| ·转基因小鼠的Southern blot 鉴定 | 第53-54页 |
| ·首建者转基因小鼠的传代 | 第54-55页 |
| ·RT-PCR 检测转基因小鼠在不同组织器官的表达情况 | 第55-56页 |
| ·转基因小鼠中sFat-1 基因表达即脂肪酸组成变化的鉴定 | 第56-63页 |
| ·讨论 | 第63-68页 |
| ·关于转基因动物的制作 | 第63-65页 |
| ·关于sFat-1 基因的周身性表达和乳腺特异性表达 | 第65-68页 |
| 第六章 制备SFAT-1 转基因动物的慢病毒载体的构建及病毒生产 | 第68-79页 |
| ·材料与方法 | 第68-70页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·病毒表达质粒的构建 | 第68-69页 |
| ·动物转基因慢病毒的生产 | 第69页 |
| ·转染NIH3T3 细胞鉴定病毒感染力 | 第69-70页 |
| ·感染小鼠胚胎 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-76页 |
| ·慢病毒表达质粒7ZF-PLV-EGFP 的构建 | 第70-72页 |
| ·慢病毒表达质粒7ZF-PLV-sFat1 的构建 | 第72-74页 |
| ·以293FT 细胞系生产慢病毒颗粒 | 第74-75页 |
| ·感染NIH3T3 细胞鉴定病毒感染力 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 个人简介 | 第85页 |
