| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-66页 |
| ·质谱技术的进展 | 第17-31页 |
| ·离子源技术的发展 | 第18-24页 |
| ·电喷雾电离源 | 第18-21页 |
| ·基质辅助激光解吸电离源 | 第21-23页 |
| ·大气压化学电离源 | 第23-24页 |
| ·质量分析器的发展 | 第24-31页 |
| ·四极杆质谱 | 第25页 |
| ·离子阱质谱 | 第25-27页 |
| ·傅立叶变换离子回旋共振质谱 | 第27-29页 |
| ·新型串联质谱 | 第29-31页 |
| ·蛋白质组学研究技术及生物质谱在蛋白质组学研究中的应用 | 第31-39页 |
| ·基于生物质谱的蛋白质组学的新策略、新技术 | 第33-34页 |
| ·双向凝胶电泳技术 | 第34-35页 |
| ·两维、多维色谱分离技术 | 第35-36页 |
| ·蛋白质芯片技术 | 第36页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第36-37页 |
| ·串联亲和纯化技术 | 第37页 |
| ·蛋白质组研究策略 | 第37-39页 |
| ·目前针对低丰度蛋白检测的技术 | 第39-46页 |
| ·蛋白质组研究策略面临的挑战 | 第39-40页 |
| ·低丰度蛋白定义 | 第40页 |
| ·低丰度蛋白分离和富集技术 | 第40-46页 |
| ·亲和色谱分离技术 | 第41-42页 |
| ·亚细胞器分离 | 第42页 |
| ·蛋白质的顺序提取 | 第42-43页 |
| ·液相等电聚焦 | 第43-44页 |
| ·针对MALDI-MS的靶上富集方法 | 第44-45页 |
| ·固相微萃取方法 | 第45-46页 |
| ·本论文选题目的、意义和创新点 | 第46-48页 |
| ·参考文献 | 第48-66页 |
| 第二章 低丰度蛋白靶上一步除盐与富集直接MALDI-MS分析的新方法 | 第66-104页 |
| ·研究背景 | 第66-70页 |
| ·实验部分 | 第70-79页 |
| ·材料和试剂 | 第70-71页 |
| ·疏水性聚合物的制备 | 第71-72页 |
| ·标准蛋白质的溶液酶解方法 | 第72页 |
| ·质谱仪器与实验条件 | 第72-73页 |
| ·微印迹MALDI靶板的制作 | 第73-74页 |
| ·双向电泳(2DE)实验条件 | 第74-75页 |
| ·胶上酶解方法 | 第75页 |
| ·商业ZipTipC18微量层析柱的样品处理方法 | 第75-76页 |
| ·商业ZipPlate微量层析板的样品处理方法 | 第76-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-98页 |
| ·一步除盐的实施步骤 | 第79-81页 |
| ·一步除盐的机理分析与现场观测 | 第81-82页 |
| ·肽段富集和除盐能力的研究 | 第82-90页 |
| ·不同类型的疏水性聚合物对除盐能力的影响 | 第90-93页 |
| ·在人肝蛋白质组表达谱中的应用 | 第93-98页 |
| ·结论 | 第98页 |
| ·参考文献: | 第98-104页 |
| 第三章 磷酸化肽段靶上浓缩与除盐直接MALDI-MS分析的研究 | 第104-120页 |
| ·研究背景 | 第104-107页 |
| ·实验部分 | 第107-108页 |
| ·试剂与样品 | 第107页 |
| ·仪器设备及分析方法 | 第107页 |
| ·蛋白质溶液酶解 | 第107页 |
| ·磷酸化肽段的靶上直接浓缩 | 第107-108页 |
| ·数据库检索和肽序列分析 | 第108页 |
| ·结果与讨论 | 第108-114页 |
| ·磷酸化肽段靶上直接浓缩的过程和机理分析 | 第108-110页 |
| ·磷酸化肽段靶上直接浓缩方法的除盐能力 | 第110-112页 |
| ·肽段磷酸化位点的串级质谱鉴定 | 第112-113页 |
| ·磷酸化肽段靶上直接浓缩与除盐方法的质谱信号重现性的研究 | 第113-114页 |
| ·结论 | 第114页 |
| ·参考文献 | 第114-120页 |
| 第四章 利用聚合物-无机纳米复合材料快速高效的富集痕量蛋白/肽段的研究 | 第120-142页 |
| ·研究背景 | 第120-121页 |
| ·实验部分 | 第121-125页 |
| ·仪器与试剂 | 第121页 |
| ·聚甲基丙烯酸甲酯接枝纳米碳酸钙材料的表征 | 第121页 |
| ·质谱仪器和实验条件 | 第121-122页 |
| ·标准蛋白质的溶液酶解方法 | 第122页 |
| ·商业ZipTipC18微量层析柱的样品处理方法 | 第122-123页 |
| ·双向电泳(2DE)实验条件 | 第123页 |
| ·胶上酶解方法 | 第123-124页 |
| ·采用CaCO_3-PMMA富集蛋白或肽段的实验方法 | 第124-125页 |
| ·结果与讨论 | 第125-136页 |
| ·实现蛋白/肽段快速高效富集的步骤与机理研究 | 第125页 |
| ·对多肽吸附行为的研究 | 第125-127页 |
| ·对蛋白质吸附行为的研究 | 第127-129页 |
| ·富集体系耐盐性的研究 | 第129-132页 |
| ·快速富集的验证 | 第132-133页 |
| ·质谱信号重现性方面的研究 | 第133-134页 |
| ·在实际样品中的应用 | 第134-136页 |
| ·结论 | 第136-137页 |
| ·参考文献 | 第137-142页 |
| 第五章 复杂多肽的串级质谱全序列分析研究 | 第142-158页 |
| ·研究背景 | 第142-144页 |
| ·实验部分 | 第144-146页 |
| ·仪器试剂 | 第144-145页 |
| ·样品预处理 | 第145页 |
| ·MALDI-TOF-TOF-MS质谱分析方法 | 第145页 |
| ·ESI-Q-TOF-MS质谱分析方法 | 第145页 |
| ·分析软件与数据库检索方法 | 第145-146页 |
| ·结果与讨论 | 第146-153页 |
| ·质谱图 | 第146页 |
| ·CID谱图与PSD谱图的比较: | 第146-147页 |
| ·不同类型质谱结果的比较 | 第147-149页 |
| ·不同分析软件的比较 | 第149-153页 |
| ·结论 | 第153-154页 |
| ·参考文献 | 第154-158页 |
| 第六章 高效液相色谱检测器—高分辩飞行时间质谱仪的研制 | 第158-172页 |
| ·研究背景 | 第158-159页 |
| ·质谱仪工作原理 | 第159-160页 |
| ·质谱仪硬件构成 | 第160-167页 |
| ·真空系统 | 第161-162页 |
| ·电喷雾离子源 | 第162-164页 |
| ·离子光学系统 | 第164-165页 |
| ·飞行时间质量分析器 | 第165-166页 |
| ·离子检测系统 | 第166-167页 |
| ·质谱仪软件 | 第167页 |
| ·性能与指数指标 | 第167-169页 |
| ·质谱仪特点 | 第169-170页 |
| ·结论 | 第170页 |
| ·参考文献 | 第170-172页 |
| 附录1.采用一步除盐法得到鉴定的蛋白质列表 | 第172-186页 |
| 附录2.采用商业ZipPlate微量层析板得到鉴定的蛋白质列表 | 第186-195页 |
| 附录3.纳米碳酸钙表面原位聚合聚甲基丙烯酸甲酯材料的表征信息 | 第195-198页 |
| 附录4.用于检测法拉第筒信号的法安级微电流放大器的研制 | 第198-202页 |
| 附录5.部分机械设计图纸 | 第202-203页 |
| 附录6.自制高分辨Q-TOF-MS操作规程与参数调试注意事项 | 第203-211页 |
| 在学期间发表与待发表的学术论文 | 第211-214页 |
| 致谢 | 第214-216页 |
