干旱胁迫下柽柳抑制性消减杂交文库的建立及EST分析
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-20页 |
| 1．1 植物抗旱性研究概况 | 第7-11页 |
| 1．1．1 植物抗旱性及抗旱机制 | 第7-10页 |
| 1．1．2 植物抗旱基因工程及树木抗旱性研究 | 第10-11页 |
| 1．2 生物信息学与表达序列标签 | 第11-14页 |
| 1．2．1 基因组学 | 第11页 |
| 1．2．2 生物信息学 | 第11-13页 |
| 1．2．3 表达序列标签(EST) | 第13-14页 |
| 1．3 抑制性消减杂交(SSH) | 第14-17页 |
| 1．3．1 SSH技术的基本原理 | 第14-15页 |
| 1．3．2 SSH技术的主要过程 | 第15-16页 |
| 1．3．3 SSH技术的优点 | 第16-17页 |
| 1．3．4 SSH技术在植物上的研究进展 | 第17页 |
| 1．4 柽柳 | 第17-20页 |
| 1．4．1 柽柳及其干旱适应特征 | 第17-18页 |
| 1．4．2 柽柳的水分胁迫调节机制研究 | 第18页 |
| 1．4．3 研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 干旱胁迫下刚毛柽柳抑制性消减文库的构建 | 第20-28页 |
| 2．1 实验材料 | 第20页 |
| 2．1．1 材料及处理 | 第20页 |
| 2．1．2 主要酶及化学试剂 | 第20页 |
| 2．1．3 引物 | 第20页 |
| 2．2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2．2．1 总 RNA提取及其消化 | 第20-21页 |
| 2．2．2 RNA反转录 | 第21页 |
| 2．2．3 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2．2．4 抑制消减杂交 | 第22-23页 |
| 2．2．5 文库的构建及克隆长度的鉴定 | 第23页 |
| 2．2．6 DNA测序与同源性比较 | 第23页 |
| 2．3 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2．3．1 RNA定性分析 | 第23-24页 |
| 2．3．2 cDNA文库消减效率的分析 | 第24页 |
| 2．3．3 SSH文库的质量分析 | 第24-25页 |
| 2．3．4 cDNA测序与同源性分析 | 第25-27页 |
| 2．4 本章小结 | 第27-28页 |
| 3 干旱胁迫下多枝柽柳的消减cDNA文库的构建 | 第28-59页 |
| 3．1 实验材料 | 第28-29页 |
| 3．1．1 材料及处理 | 第28页 |
| 3．1．2 菌种及载体 | 第28页 |
| 3．1．3 主要酶及化学试剂 | 第28页 |
| 3．1．4 引物 | 第28页 |
| 3．1．5 LB培养基配方 | 第28-29页 |
| 3．1．6 主要仪器设备 | 第29页 |
| 3．1．7 分析软件 | 第29页 |
| 3．2 实验方法 | 第29-39页 |
| 3．2．1 SDS法提取柽柳总 RNA | 第29-30页 |
| 3．2．2 磁性球珠分离mRNA | 第30-31页 |
| 3．2．3 抑制消减杂交文库的构建 | 第31-35页 |
| 3．2．4 载体的连接及转化 | 第35页 |
| 3．2．5 插入片段长度的检测 | 第35-36页 |
| 3．2．6 质粒培养 | 第36页 |
| 3．2．7 模板制备 | 第36-37页 |
| 3．2．8 测序PCR反应 | 第37-38页 |
| 3．2．9 测序 | 第38页 |
| 3．2．10 序列分析 | 第38-39页 |
| 3．3 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3．3．1 RNA的提取及mRNA的分离 | 第39页 |
| 3．3．2 SSH文库构建及质量检测 | 第39-41页 |
| 3．3．3 DNA序列测定 | 第41-42页 |
| 3．3．4 EST结果分析 | 第42-58页 |
| 3．4 本章小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
