| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| ·烟草病毒病及其防治技术 | 第11-12页 |
| ·烟草病毒介绍 | 第11页 |
| ·烟草病毒病发生与防治技术 | 第11-12页 |
| ·RNAI及其在烟草抗病毒中的应用 | 第12-16页 |
| ·RNAi 的发现 | 第13页 |
| ·RNAi 的机制和特点 | 第13-14页 |
| ·病毒对 RNAi 的抑制 | 第14-15页 |
| ·RNAi 在烟草抗病毒领域的应用 | 第15-16页 |
| ·GATEWAY 技术简介 | 第16-17页 |
| ·Gateway 技术的原理 | 第16-17页 |
| ·Gateway 技术构建 RNA 干扰载体过程 | 第17页 |
| ·植物抗病基因研究进展 | 第17-21页 |
| ·植物抗病基因作用机制 | 第18-19页 |
| ·植物抗病基因的分类 | 第19-20页 |
| ·绒毛状烟草基因组测序获得抗病基因情况简介 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的意义、主要内容、技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究的目的意义 | 第21页 |
| ·研究的主要内容 | 第21-22页 |
| ·研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 绒毛状烟草抗病毒相关基因 RNAI 载体构建 | 第23-32页 |
| ·材料和方法 | 第23-29页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·主要实验试剂 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·绒毛状烟草抗病毒病相关基因的筛选 | 第24-25页 |
| ·含 attB 特异位点的引物设计 | 第25页 |
| ·烟草红花大金元总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·cDNA 合成 | 第26页 |
| ·抗病毒相关基因 RNAi 片段的克隆 | 第26-27页 |
| ·抗病毒相关基因 RNAi 载体构建 | 第27-29页 |
| ·结果分析 | 第29-31页 |
| ·RT-PCR 扩增 R 基因片段 | 第29-30页 |
| ·入门载体的检测 | 第30页 |
| ·表达载体的检测 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 红花大金元转基因体系的优化 | 第32-42页 |
| ·材料与方法 | 第32-37页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·试验菌株 | 第32页 |
| ·试验所用培养基 | 第32页 |
| ·RNAi 载体电击法转化农杆菌 | 第32-33页 |
| ·烟草红花大金元无菌苗的获得 | 第33页 |
| ·红大品种对潮霉素浓度的敏感性试验 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化过程 | 第34-36页 |
| ·转基因烟草总 DNA 的提取 | 第36-37页 |
| ·转基因烟草的 PCR 检测 | 第37页 |
| ·结果分析 | 第37-41页 |
| ·红大种子消毒时间的对发芽情况的影响 | 第37-38页 |
| ·潮霉素浓度对红大叶片愈伤组织分化的影响 | 第38-39页 |
| ·潮霉素浓度对红大无菌苗生根过程的影响 | 第39页 |
| ·农杆菌侵染浓度和侵染时间对侵染效率的影响 | 第39-40页 |
| ·转基因烟草 PCR 检测的结果 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 转基因烟草 TMV 抗性的鉴定 | 第42-48页 |
| ·材料与方法 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·转基因烟草及对照接种 TMV 病毒处理 | 第42页 |
| ·发病情况调查 | 第42页 |
| ·Real-time PCR 定量检测 TMV 含量体系建立 | 第42-43页 |
| ·结果分析 | 第43-47页 |
| ·接毒材料 TMV 发病情况调查结果 | 第43-45页 |
| ·TMV 基因和内参基因 Actin 的标准曲线 | 第45-46页 |
| ·Real-time PCR 检测 TMV 含量结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 全文结论 | 第48-49页 |
| ·抗病毒病相关基因 RNA 干扰载体的构建 | 第48页 |
| ·烟草红花大金元转化体系的优化 | 第48页 |
| ·转基因烟草 TMV 抗性鉴定 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |
