| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1 细胞凋亡的机理和途径 | 第13-20页 |
| ·细胞凋亡的线粒体依赖性途径和死亡受体途径 | 第13-16页 |
| ·凋亡相关蛋白 | 第16-18页 |
| ·与细胞凋亡相关的蛋白酶 | 第18-20页 |
| 2 天然蛋白酶抑制剂概述 | 第20-24页 |
| ·分类 | 第21-22页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂的作用机理 | 第22页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构及其与酶的相互作用 | 第22-24页 |
| 3 荞麦蛋白酶抑制剂研究进展 | 第24-28页 |
| ·荞麦蛋白酶抑制剂的理化性质 | 第25页 |
| ·荞麦蛋白酶抑制剂的研究现状 | 第25-27页 |
| ·荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导细胞发生凋亡的研究意义 | 第27-28页 |
| 第二章 BTI基因的克隆及原核表达载体的构建 | 第28-39页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| ·菌株与质粒 | 第28页 |
| ·主要的工具酶及试剂 | 第28页 |
| ·寡聚核苷酸 | 第28-29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-34页 |
| ·BTI基因的克隆 | 第30-33页 |
| ·pQE31-BTI原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-39页 |
| ·BTI基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·pQE31-BTI原核表达载体的构建 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 BTI的表达、纯化及抑制活性分析 | 第39-51页 |
| 1 材料 | 第39-40页 |
| ·菌株与质粒 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·主要实验仪器 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-44页 |
| ·E.coli M15／pQE31-BTI的诱导表达 | 第40-41页 |
| ·表达条件的优化 | 第41-42页 |
| ·表达产物的分离纯化及鉴定 | 第42-43页 |
| ·rBTI的生化分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与讨论 | 第44-51页 |
| ·E.coli M15／pQE31-BTI的诱导表达及表达条件的优化 | 第44-47页 |
| ·表达产物的分离纯化及鉴定 | 第47-49页 |
| ·rBTI的部分性质分析 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 第四章 rBTI对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响 | 第51-59页 |
| 1 材料 | 第51-52页 |
| ·细胞 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-54页 |
| ·细胞培养 | 第52-54页 |
| ·MTT法检测 | 第54页 |
| ·流式细胞术检测 | 第54页 |
| 3 结果与讨论 | 第54-59页 |
| ·细胞形态观察 | 第54-56页 |
| ·MTT实验结果 | 第56页 |
| ·流式细胞仪实验结果 | 第56-57页 |
| ·分析与讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 小结与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 承诺书 | 第67页 |