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柑桔种子球蛋白基因启动子5端缺失与特异性表达分析

缩略词第1-7页
内容摘要第7-9页
英文摘要第9-11页
第一部分 前言第11-25页
   ·文献综述--高等植物组织特异性启动子研究第11-24页
     ·植物基因启动子的一般特征第11-12页
       ·转录起始位点第11页
       ·TATA-box第11-12页
       ·G-box保守序列第12页
       ·CAAT-box第12页
     ·高等植物的组织特异性启动子第12-18页
       ·叶片特异性表达启动子第14-15页
       ·种子特异性表达启动子第15页
       ·维管束特异性表达启动子第15-16页
       ·果实特异性表达启动子第16-17页
       ·块茎专一性表达启动子第17页
       ·花药(花粉)特异性表达启动子第17-18页
     ·组织特异性启动子在植物基因工程中的应用第18-21页
       ·抗虫基因工程第18-19页
       ·抗病基因工程第19页
       ·抗除草剂基因工程第19-20页
       ·花卉改良基因工程第20页
       ·果品贮藏基因工程第20页
       ·种子品质基因工程及生物反应器第20-21页
     ·研究顺式作用元件的方法第21-24页
       ·5′端缺失法第21-22页
       ·内部缺失突变法第22页
       ·衔接物扫描突变法第22页
       ·定点突变法第22页
       ·凝胶阻滞分析法第22页
       ·足迹法第22-24页
         ·保护法第23页
         ·干扰法第23-24页
   ·引言第24-25页
     ·本研究的目的和意义第24页
     ·本文的主要研究内容第24-25页
第二部分 柑桔种子球蛋白基因启动子的5′端缺失分析第25-49页
   ·材料与方法第25-33页
     ·材料第25-27页
       ·植物材料第25页
       ·细菌菌株第25页
       ·试剂第25-26页
       ·培养基第26页
         ·植物培养基第26页
         ·细菌培养基第26页
       ·常用溶液第26-27页
         ·常用抗生素储备液浓度第26页
         ·CTAB法提取植物总DNA所用溶液第26-27页
         ·碱法提取质粒DNA所用溶液第27页
         ·GUS活性检测所用溶液第27页
           ·组织化学显色所用溶液第27页
           ·荧光检测所用溶液第27页
         ·其他常用溶液第27页
     ·试验方法第27-33页
       ·大肠杆菌质粒的提取第27-28页
       ·农杆菌LBA 4404感受态细胞的制备及转化第28页
         ·农杆菌LBA 4404感受态细胞的制备第28页
         ·农杆菌LBA 44404感受态细胞的转化第28页
       ·农杆菌转化子的鉴定第28-29页
         ·引物序列第28-29页
         ·PCR反应体系第29页
         ·PCR反应条件第29页
         ·样品的设置及电泳检测第29页
       ·烟草再生体系的建立第29页
         ·烟草的组织培养第29页
         ·外植体对ppt敏感性试验第29页
       ·烟草的遗传转化第29-30页
       ·拟转基因烟草总DNA的提取第30页
       ·拟转基因烟草基因组DNA的PCR扩增第30-31页
         ·引物序列第30页
         ·PCR反应体系第30页
         ·PCR反应条件第30-31页
       ·转基因烟草的移栽和田间管理第31页
       ·转基因烟草gus基因的表达分析第31-33页
         ·gus基因的荧光检测分析第31-32页
           ·GUS提取第31页
           ·GUS提取液蛋白含量测定第31-32页
           ·酶反应第32页
           ·荧光测定第32页
           ·酶活力计算第32页
         ·转基因烟草gus基因表达的组织化学分析第32-33页
   ·结果与分析第33-42页
     ·农杆菌LBA4404转化子的鉴定第33页
     ·烟草选择压的确定第33-34页
     ·烟草转化及转化体的筛选第34-35页
     ·转基因烟草的PCR检测第35页
     ·转基因烟草形态特征变化分析第35-37页
       ·田间栽培转基因植株形态观察及分析第35-36页
       ·田间栽培转基因植株生长状况分析第36-37页
     ·转基因植株中gus基因表达的组织化学和GUS酶活性检测第37-42页
       ·gus基因表达的组织化学检测结果第37-38页
       ·GUS酶活性的定量测定结果第38-42页
   ·讨论第42-49页
     ·citrin基因启动子的基本特征第42页
     ·citrin基因启动子中组织特异性表达的顺式元件分析第42-43页
     ·citrin基因启动子中信号诱导表达的顺式元件分析第43-45页
     ·citrin基因启动子组织及时空特异性表达活性的分析第45页
     ·citrin基因启动子缺失对转基因烟草中外源基因表达的影响第45-46页
     ·citrin基因启动子特异性表达的顺式元件分析第46-49页
结论第49-50页
参考文献第50-57页
图版第57-63页
致谢第63页

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