| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-32页 |
| 1．梨火疫病菌的历史、危害及生物学 | 第11-16页 |
| 1．1 梨火疫病菌的简史 | 第11页 |
| 1．2 危害症状 | 第11页 |
| 1．3 病原菌形态及生物学 | 第11-12页 |
| 1．4 危害情况 | 第12页 |
| 1．5 病害循环 | 第12-13页 |
| 1．6 梨火疫病菌的寄主范围 | 第13-15页 |
| 1．7 梨火疫病菌的地理分布 | 第15-16页 |
| 1．8 梨火疫病菌的传播 | 第16页 |
| 2．传统的细菌鉴定检测方法 | 第16-21页 |
| 2．1 植物病原的检测、鉴定及病害的诊断 | 第16-17页 |
| 2．2 梨火疫病菌的检验检测 | 第17-21页 |
| 3．分子生物学检测方法 | 第21-30页 |
| 3．1 核酸探针杂交技术及多聚酶链式反应(PCR)技术 | 第22-25页 |
| 3．2 革新的PCR技术 | 第25-28页 |
| 3．3 检测梨火疫病菌的PCR技术 | 第28-30页 |
| 3．4 其他检测方法 | 第30页 |
| 4．立题依据和技术路线 | 第30-32页 |
| 4．1 立题依据 | 第30-31页 |
| 4．2 技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 梨火疫病菌检测技术研究 | 第32-59页 |
| 第一节 抗血清的制备 | 第32-34页 |
| 1．材料和方法 | 第32-34页 |
| 1．1 菌株 | 第32-33页 |
| 1．2 实验动物 | 第33页 |
| 1．3 仪器与设备 | 第33页 |
| 1．4 梨火疫病菌抗血清的制备 | 第33-34页 |
| 1．5 抗血清效价和专化性测定 | 第34页 |
| 2．结果与分析 | 第34页 |
| 第二节 利用免疫吸附技术提高PCR检测灵敏度的研究 | 第34-42页 |
| 1．材料与方法 | 第35-37页 |
| 1．1 供试菌株 | 第35页 |
| 1．2 引物及序列 | 第35页 |
| 1．3 PCR试剂及PCR仪 | 第35-36页 |
| 1．4 供试菌处理 | 第36页 |
| 1．5 免疫吸附法程序 | 第36页 |
| 1．6 标准PCR程序 | 第36-37页 |
| 1．7 免疫吸附—PCR程序 | 第37页 |
| 1．8 用免疫吸附—PCR技术检测引物专化性和灵敏度的研究 | 第37页 |
| 2．结果与分析 | 第37-42页 |
| 2．1 引物A-B检测结果 | 第37-39页 |
| 2．2 引物REA-FEA检测结果 | 第39-41页 |
| 2．3 讨论 | 第41-42页 |
| 第三节 梨火疫病菌的ITS序列及专化性引物的设计与合成 | 第42-51页 |
| 1．材料与方法 | 第42-47页 |
| 1．1 供试菌株 | 第42-44页 |
| 1．2 基因组DNA的提取和菌体的制备 | 第44-45页 |
| 1．3 核糖体DNA ITS区域的PCR扩增 | 第45-46页 |
| 1．4 PCR产物的克隆和测序 | 第46-47页 |
| 2．结果与分析 | 第47-50页 |
| 2．1 基因组DNA的提取 | 第47页 |
| 2．2 ITS区域的PCR扩增 | 第47-48页 |
| 2．3 PCR扩增片断的纯化与回收 | 第48-49页 |
| 2．4 ITS区域的序列比较 | 第49页 |
| 2．5 引物的设计与合成 | 第49页 |
| 2．6 用PCR技术检测引物专化性的分析 | 第49-50页 |
| 3．讨论 | 第50-51页 |
| 第四节 基于ITS序列的梨火疫病菌单管Nested-PCR检测 | 第51-59页 |
| 1．材料与方法 | 第51-54页 |
| 1．1 参试菌株 | 第51-52页 |
| 1．2 引物的设计与合成 | 第52-53页 |
| 1．3 PCR试剂及PCR仪 | 第53页 |
| 1．4 供试菌处理 | 第53页 |
| 1．5 标准PCR程序 | 第53-54页 |
| 1．6 单管Nested-PCR程序 | 第54页 |
| 1．7 用单管Nested-PCR技术检测引物专化性和灵敏度的研究 | 第54页 |
| 2．结果与分析 | 第54-57页 |
| 2．1 引物设计 | 第54-55页 |
| 2．2 单管Nested-PCR外部引物扩增结果 | 第55页 |
| 2．3 单管Nested-PCR内部引物扩增结果 | 第55-56页 |
| 2．4 单管Nested-PCR灵敏度检测结果 | 第56-57页 |
| 3．讨论 | 第57-59页 |
| 第三章 全文结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 附录(一) 三个梨火疫病菌菌株ITS区域序列 | 第66-67页 |
| 附录(二) 专利申请受理通知书 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
