目录 | 第1-4页 |
中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-11页 |
1 材料与方法 | 第11-24页 |
·实验试剂及物品 | 第11-14页 |
·仪器与设备 | 第14-15页 |
·技术路线 | 第15-17页 |
·差异表达NMPs的分离与初步鉴定 | 第15-16页 |
·进一步验证STRBP8在SHEE和SHEEC细胞中的差异性 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-24页 |
·细胞培养 | 第17页 |
·NMPs的提取 | 第17页 |
·蛋白浓度的测定 | 第17页 |
·SDS-PAGE | 第17-18页 |
·Western blotting | 第18页 |
·双向电泳及银染 | 第18-19页 |
·双向电泳凝胶图像分析 | 第19-20页 |
·MALDI-TOF-MS分析 | 第20页 |
·细胞培养及总RNA的提取 | 第20-21页 |
·RT-PCR扩增STRBP8的cDNA | 第21页 |
·STRBP8 cDNA的克隆与鉴定 | 第21-23页 |
·序列测定及BLAST分析 | 第23页 |
·利用生物信息学手段初步预测STRBP8的结构和功能 | 第23-24页 |
2 结果 | 第24-37页 |
·NMPs的制备及蛋白含量的测定 | 第24页 |
·SDS-PAGE结果分析 | 第24-25页 |
·Western blotting分析 | 第25-27页 |
·SHEE和SHEEC细胞NMPs的双向电泳图谱及其差异表达分析 | 第27-28页 |
·MALDI-TOF-MS鉴定食管癌差异表达NMPs | 第28-30页 |
·细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
·STRBP8基因的RT-PCR分析 | 第31-32页 |
·STRBP8 cDNA的克隆与鉴定 | 第32页 |
·测序结果及其BLAST分析 | 第32-35页 |
·STRBP8蛋白的生物信息学分析 | 第35-37页 |
3 讨论 | 第37-45页 |
·双向凝胶电泳技术的建立及其优化 | 第37-38页 |
·样品的制备以及非蛋白质组分对双向电泳结果的影响 | 第37页 |
·加样量和第一向等电聚焦对双向电泳结果的影响 | 第37-38页 |
·平衡和二向间的转移对双向电泳结果的影响 | 第38页 |
·有关双向电泳凝胶图像分析方法的讨论 | 第38-39页 |
·NMPs的制备 | 第39页 |
·NMPs质量的鉴定 | 第39页 |
·差异表达NMPs的功能意义 | 第39-41页 |
·STRBP8的RT-PCR分析 | 第41页 |
·STRBP8 cDNA的克隆、测序及BLAST分析 | 第41-42页 |
·STRBP8与RBP8的关系 | 第42-43页 |
·STRBP8蛋白的生物信息学分析 | 第43-45页 |
4 小结 | 第45-46页 |
5 参考文献 | 第46-52页 |
综述 | 第52-66页 |
附录1: 论文摘要 | 第66-67页 |
附录2: 英文缩写词 | 第67-70页 |
附录3: 溶液的配制 | 第70-80页 |
硕士研究生期间发表的论文 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |