| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-48页 |
| 1. 植物花药发育与雄性不育 | 第13-27页 |
| ·花的发育 | 第13-16页 |
| ·花诱导 | 第13-14页 |
| ·花分生组织的形成 | 第14页 |
| ·花器官原基的形成 | 第14-15页 |
| ·花发育调控基因的结构特征与作用机制 | 第15-16页 |
| ·花药发育 | 第16-18页 |
| ·花药发育过程中基因的表达调控 | 第18-27页 |
| ·减数分裂 | 第19-22页 |
| ·花药发育过程中的减数分裂 | 第19-21页 |
| ·减数分裂过程中基因的表达与调控 | 第21页 |
| ·减数分裂与细胞核雄性不育 | 第21-22页 |
| ·绒毡层(Tapetum) | 第22-27页 |
| ·绒毡层的发育 | 第22-23页 |
| ·已克隆的在绒毡层中特异表达的基因 | 第23-25页 |
| ·绒毡层发育及其对花粉育性的影响 | 第25-27页 |
| 2. 太谷核不育小麦研究进展 | 第27-33页 |
| ·太谷核不育小麦的发现 | 第27页 |
| ·太谷核不育小麦的遗传分析: | 第27页 |
| ·太谷核不育小麦雄性败育过程的细胞学特征: | 第27-29页 |
| ·太谷核不育小麦雄性败育过程中的生理生化研究 | 第29页 |
| ·太谷核不育基因的特点: | 第29页 |
| ·太谷核不育小麦在种质创新与拓展方面的应用 | 第29-30页 |
| ·矮败小麦 | 第30页 |
| ·Tal kr phlb综合体 | 第30页 |
| ·太谷核不育基因在育种上的应用及取得的成就 | 第30-32页 |
| ·太谷核不育小麦在育种上的应用 | 第31页 |
| ·太谷核不育小麦在育种上所取得的成就 | 第31-32页 |
| ·目前在小麦中发现的雄性不育 | 第32页 |
| ·研究太谷核不育基因的重要性及克隆该基因的重大意义 | 第32-33页 |
| 3. 植物基因克隆及表达分析 | 第33-47页 |
| ·图位克隆技术与分子标记 | 第35-39页 |
| ·图位克隆技术的原理 | 第35页 |
| ·图位克隆技术的基本环节 | 第35-38页 |
| ·利用图位克隆技术成功克隆的基因 | 第38-39页 |
| ·图位克隆技术的局限性 | 第39页 |
| ·基于同源序列的候选基因法(Homology-based candidate gene method) | 第39-42页 |
| ·基于同源序列的候选基因法原理 | 第39-40页 |
| ·基于同源序列的候选基因法关键技术环节 | 第40-41页 |
| ·基于同源序列的候选基因法优越性与局限性 | 第41-42页 |
| ·cDNA-AFLP技术(cDNA amplified fragments Length Polymorphism) | 第42-46页 |
| ·cDNA-AFLP技术的基本原理和方法 | 第42-43页 |
| ·cDNA-AFLP技术特点 | 第43-44页 |
| ·cDNA-AFLP技术的应用与发展前景 | 第44-46页 |
| ·电子克隆(in silico cloning) | 第46-47页 |
| ·电子克隆技术的原理 | 第46页 |
| ·电子克隆技术的关键技术环节 | 第46-47页 |
| ·电子克隆技术的优缺点 | 第47页 |
| 4. 立题依据 | 第47-48页 |
| 第二章 小麦雄性不育基因同源序列的分离鉴定及表达分析 | 第48-69页 |
| 1. 材料和方法 | 第48-56页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-56页 |
| ·总RNA提取 | 第48-49页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·扩增片段的克隆及测序 | 第51-54页 |
| ·增片段的回收、纯化 | 第51页 |
| ·PCR产物连接 | 第51-52页 |
| ·感受态细胞制备 | 第52页 |
| ·PCR产物转化 | 第52-53页 |
| ·菌液PCR检测 | 第53-54页 |
| ·测序结果分析 | 第54页 |
| ·RFLP定位 | 第54-56页 |
| ·RT-PCR表达分析 | 第56页 |
| 2. 结果与分析 | 第56-64页 |
| ·矮败小麦中国春小麦回交群体的分析 | 第56-57页 |
| ·太谷核不育小麦可育花药与不育花药总RNA检测结果 | 第57-58页 |
| ·太谷核不育小麦中雄性不育基因同源序列的克隆 | 第58-64页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第58页 |
| ·太谷核不育小麦中雄性不育基因同源序列的克隆以及序列分析 | 第58-60页 |
| ·太谷核不育小麦中雄性不育基因同源序列分析 | 第60-62页 |
| ·太谷核不育小麦中雄性不育基因同源序列RT-12的电子延伸 | 第62-63页 |
| ·太谷核不育小麦中雄性不育基因同源序列RT-12延伸序列分析 | 第63-64页 |
| ·太谷核不育小麦中雄性不育基因同源序列的表达分析 | 第64页 |
| 3. 讨论 | 第64-69页 |
| ·小麦基因组中存在与拟南芥Ms2基因同源的雄性不育同源序列 | 第64-66页 |
| ·电子克隆技术在小麦基因克隆中的有效性问题 | 第66-69页 |
| 第三章 太谷核不育基因分子标记的筛选 | 第69-89页 |
| 1. 材料与方法 | 第71-74页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-74页 |
| ·基因组DNA的提取及检测 | 第71-72页 |
| ·SSR | 第72-73页 |
| ·RFLP探针筛选 | 第73页 |
| ·反向Northern Blot杂交技术 | 第73-74页 |
| ·总RNA的提取 | 第73页 |
| ·点膜 | 第73页 |
| ·cDNA探针的合成及标记 | 第73-74页 |
| 2. 结果与分析 | 第74-84页 |
| ·小麦4D染色体短臂上11对SSR引物筛选结果: | 第74-75页 |
| ·9个RFLP探针筛选结果: | 第75-77页 |
| ·利用4D染色体短臂上的EST设计引物寻找标记 | 第77-81页 |
| ·水稻第三染色体长臂ms7-bcl区域与小麦4D染色体短臂ms2-Rht10区域的比较基因组分析: | 第81-84页 |
| 3. 讨论 | 第84-89页 |
| ·关于筛选与ms2或Rht10基因紧密连锁分子标记可行性的问题 | 第84-87页 |
| ·小麦ms2-Rht10区域与水稻ms7-bcl区域比较及利用比较基因组获得分子标记的可行性问题 | 第87-89页 |
| 第四章 从小麦EST中开发新的SSR引物 | 第89-102页 |
| 1. 材料与方法: | 第89-90页 |
| ·材料 | 第89页 |
| ·方法 | 第89-90页 |
| ·DNA的提取 | 第89-90页 |
| ·含SSR小麦EST序列的检索: | 第90页 |
| ·SSR引物设计 | 第90页 |
| ·SSR扩增反应 | 第90页 |
| 2. 结果与分析 | 第90-96页 |
| ·SSR-ESTs检索结果与分析 | 第90-92页 |
| ·EST-SSR(cSSR)引物设计及筛选结果 | 第92-96页 |
| 3. 讨论 | 第96-102页 |
| ·EST的飞速发展为开发利用新SSR和SNP引物提供了宝贵资源 | 第96-97页 |
| ·EST中简单重复序列(SSR)的分布特点 | 第97-98页 |
| ·EST-SSRs引物的优点及发展前景 | 第98-102页 |
| 第五章 利用cDNA-AFLP技术分析太谷核不育及可育小麦花药相关基因差异表达 | 第102-117页 |
| 1. 材料与方法 | 第102-108页 |
| ·材料 | 第103页 |
| ·方法 | 第103-108页 |
| ·RNA的提取 | 第103页 |
| ·cDNA双链的合成 | 第103-104页 |
| ·AFLP分析 | 第104-107页 |
| ·模板cDNA浓度的检测 | 第104页 |
| ·酶切及接头连接 | 第104页 |
| ·预扩增 | 第104-105页 |
| ·选择性扩增 | 第105-106页 |
| ·胶的制备及电泳、银染程序 | 第106页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶中差异片段的回收 | 第106-107页 |
| ·二次PCR产物纯化 | 第107页 |
| ·差异片段测序及序列分析 | 第107页 |
| ·测序PCR反应体系及反应程序 | 第107页 |
| ·测序PCR产物纯化 | 第107页 |
| ·序列分析 | 第107页 |
| ·反向Northern Blot分析 | 第107-108页 |
| 2. 结果与分析 | 第108-114页 |
| ·矮败小麦近等基因系减数分裂前期花药cDNA-AFLP多态性分析 | 第108-109页 |
| ·二次PCR扩增及序列测定 | 第109页 |
| ·反向Northern Blot杂交 | 第109-110页 |
| ·差异片段序列分析 | 第110-114页 |
| ·败育花药中特异表达序列分析 | 第111-112页 |
| ·可育花药中特异表达序列分析 | 第112-114页 |
| 3. 讨论 | 第114-117页 |
| 全文结论 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-141页 |
| 附录1 | 第141-143页 |
| 附录2 | 第143-144页 |
| 附录3 | 第144-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
