| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-37页 |
| 1．1 生长因子、表皮生长因子及人表皮生长因子 | 第11-13页 |
| 1．2 hEGF的生物学效应及其作用基本机理 | 第13-16页 |
| 1．2．1 hEGF的生物学效应 | 第13-14页 |
| 1．2．2 hEGF与hEGF受体 | 第14-15页 |
| 1．2．3 hEGF与hEGF-R结合的信号传递过程 | 第15-16页 |
| 1．2．4 hEGF与hEGF—R结合的复合物对蛋白激酶的活性 | 第16页 |
| 1．3 hEGF的来源——内源性hEGF与外源性hEGF | 第16-18页 |
| 1．3．1 内源性hEGF | 第16页 |
| 1．3．2 应用固相化学人工合成hEGF | 第16页 |
| 1．3．3 基因重组生产rhEGF | 第16-18页 |
| 1．4 hEGF的定性、定量及活性检测 | 第18-21页 |
| 1．4．1 定性检测 | 第18-19页 |
| 1．4．2 定量检测 | 第19-21页 |
| 1．4．3 生物活性检测 | 第21页 |
| 1．5 hEGF的分离纯化工艺 | 第21-23页 |
| 1．5．1 天然内源性hEGF的分离纯化工艺 | 第21-22页 |
| 1．5．2 rhEGF的分离纯化工艺 | 第22-23页 |
| 1．6 hEGF的应用 | 第23-29页 |
| 1．6．1 hEGF应用的基础问题研究 | 第23-25页 |
| 1．6．2 hEGF的应用 | 第25-29页 |
| 1．6．3 国内外hEGF产业化的现状 | 第29页 |
| 1．7 展望 | 第29-30页 |
| 1．8 本文研究目标与思路 | 第30-31页 |
| 1．8．1 研究目标 | 第30页 |
| 1．8．2 研究思路与方法 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-37页 |
| 第二章 材料与方法 | 第37-41页 |
| 2．1 实验材料 | 第37页 |
| 2．1．1 rhEGF的表达质粒及其宿主菌株 | 第37页 |
| 2．1．2 培养基 | 第37页 |
| 2．2 实验方法 | 第37-38页 |
| 2．2．1 质粒的转化及转化筛选 | 第37页 |
| 2．2．2 种子培养和发酵生产rhEGF | 第37-38页 |
| 2．3 分析方法 | 第38页 |
| 2．3．1 rhEGF定性分析 | 第38页 |
| 2．3．2 rhEGF定量分析 | 第38页 |
| 2．3．3 色素测定方法 | 第38页 |
| 2．3．4 总蛋白含量粗略测定 | 第38页 |
| 2．4 主要实验设备与仪器 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 第三章 大肠杆菌发酵液中rhEGF的初步分离 | 第41-51页 |
| 3．1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3．1．1 rhEGF发酵离心液制备 | 第42页 |
| 3．1．2 仪器与试剂 | 第42页 |
| 3．1．3 分析方法 | 第42-43页 |
| 3．1．4 实验方法 | 第43-44页 |
| 3．2 结果与讨论 | 第44-50页 |
| 3．2．1 盐析曲线和pH下降曲线 | 第44页 |
| 3．2．2 盐析正交试验结果分析 | 第44-45页 |
| 3．2．3 盐析单因素试验结果及分析 | 第45-48页 |
| 3．2．4 透析单因素试验结果 | 第48-50页 |
| 3．3 结论 | 第50页 |
| 参考文献 | 第50-51页 |
| 第四章 离子交换层析纯化rhEGF | 第51-59页 |
| 4．1 材料与方法 | 第52-53页 |
| 4．1．1 实验材料 | 第52页 |
| 4．1．2 实验仪器 | 第52页 |
| 4．1．3 分析方法 | 第52-53页 |
| 4．1．4 实验方法 | 第53页 |
| 4．2 结果与讨论 | 第53-58页 |
| 4．2．1 PBS的pH对DEAE树脂静态吸附rhEGF的影响 | 第53-54页 |
| 4．2．2 离子强度对DEAE静态吸附rhEGF的影响 | 第54页 |
| 4．2．3 DEAE树脂柱rhEGF穿透曲线及rhEGF动态交换容量 | 第54-55页 |
| 4．2．4 DEAE树脂柱高对rhEGF离子交换的影响 | 第55-56页 |
| 4．2．5 进样与洗脱流速对rhEGF离子交换的影响 | 第56页 |
| 4．2．6 进样体积与浓度对rhEGF离子交换的影响 | 第56页 |
| 4．2．7 DEAE离子交换逐次洗脱rhEGF曲线 | 第56-57页 |
| 4．2．8 DEAE离子交换柱的再生曲线 | 第57-58页 |
| 4．3 结论 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第五章 中等纯度rhEGF洗脱液的脱色 | 第59-70页 |
| 5．1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 5．1．1 实验材料与仪器 | 第60页 |
| 5．1．2 分析方法 | 第60-61页 |
| 5．1．3 实验方法 | 第61-62页 |
| 5．2 结果与讨论 | 第62-69页 |
| 5．2．1 比色法检测色素的波长确定 | 第62页 |
| 5．2．2 脱色树脂（剂）的选择 | 第62-64页 |
| 5．2．3 色素在D314中的等温吸附曲线 | 第64页 |
| 5．2．4 D314脱色的穿透曲线与饱和色素吸附容量 | 第64-65页 |
| 5．2．5 D314树脂L_9（3~4）脱色正交试验结果分析 | 第65-66页 |
| 5．2．6 D314树脂脱色单因素试验结果 | 第66-68页 |
| 5．2．7 D314树脂中色素洗脱曲线 | 第68-69页 |
| 5．3 结论 | 第69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 第六章 中等纯度rhEGF冻干粉制造及质量指标 | 第70-75页 |
| 6．1 材料与方法 | 第70-71页 |
| 6．1．1 实验材料 | 第70页 |
| 6．1．2 仪器与试剂 | 第70页 |
| 6．1．3 分析方法 | 第70-71页 |
| 6．1．4 实验方法 | 第71页 |
| 6．2 结果与讨论 | 第71-74页 |
| 6．2．1 rhEGF真空冻干曲线 | 第71页 |
| 6．2．2 rhEGF冻干粉稳定保护剂的确定 | 第71-73页 |
| 6．2．3 rhEGF冻干粉质量指标 | 第73-74页 |
| 6．3 结论 | 第74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 第七章 rhEGF在美容产品中的应用性研究 | 第75-85页 |
| 7．1 材料与方法 | 第75-79页 |
| 7．1．1 rhEGF冻干粉的制备 | 第75-76页 |
| 7．1．2 仪器与试剂 | 第76页 |
| 7．1．3 分析方法 | 第76页 |
| 7．1．4 实验方法 | 第76-79页 |
| 7．2 结果与讨论 | 第79-84页 |
| 7．2．1 pH温度对rhEGF冻干粉水剂稳定性的影响 | 第79页 |
| 7．2．2 rhEGF使用浓度对美容效果影响 | 第79-80页 |
| 7．2．3 rhEGF与HA、丝蛋白的协同美容效果 | 第80-81页 |
| 7．2．4 rhEGF冻干粉水剂临床疗效比较 | 第81页 |
| 7．2．5 三种含rhEGF生物化妆品使用效果 | 第81-84页 |
| 7．3 结论 | 第84页 |
| 参考文献 | 第84-85页 |
| 第八章 结论 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 研究生阶段发表／录用论文情况 | 第88页 |
