爪蟾卵母细胞人类LDLR基因表达系统的建立及姜黄素的干预作用
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 一、 前言 | 第10-11页 |
| 二、 材料与方法 | 第11-24页 |
| (一) 材料 | 第11-15页 |
| 1 实验动物 | 第11页 |
| 2 小鼠巨噬细胞株(ANA-1) | 第11页 |
| 3 人类LDLR基因 | 第11页 |
| 4 大肠杆菌 | 第11-12页 |
| 5 主要试剂 | 第12页 |
| 6 主要仪器 | 第12-13页 |
| 7 试剂配制 | 第13-15页 |
| (二) 方法 | 第15-24页 |
| 1 爪蟾的饲养 | 第15-16页 |
| 2 爪蟾卵母细胞的培养 | 第16页 |
| 3 爪蟾卵母细胞核显微注射 | 第16-17页 |
| 4 LDL分离纯化 | 第17-18页 |
| 5 DiI-LDL的制备 | 第18页 |
| 6 DiI-LDL配体活性检测 | 第18-19页 |
| 7 爪蟾Ⅴ、Ⅵ期卵母细胞膜内源性LDLR检测 | 第19-20页 |
| 8 人类LDLR基因表达质粒的构建 | 第20-21页 |
| 9 人类LDLR基因的表达 | 第21-22页 |
| 10 姜黄素最佳实验浓度选择 | 第22-23页 |
| 11 姜黄素对爪蟾卵母细胞存活率的影响 | 第23页 |
| 12 姜黄素对人类LDLR基因表达的影响 | 第23-24页 |
| 三、 实验结果 | 第24-30页 |
| (一) 爪蟾的饲养 | 第24页 |
| (二) 爪蟾卵母细胞的培养 | 第24-25页 |
| (三) 核注射后卵母细胞培养情况 | 第25页 |
| 1 爪蟾卵母细胞细胞核的显微注射 | 第25页 |
| 2 实验组和对照组细胞的存活率 | 第25页 |
| (四) LDL的分离纯化 | 第25-26页 |
| (五) DiI-LDL配体活性检测 | 第26页 |
| (六) 爪蟾卵母细胞膜内源性LDLR检测 | 第26-27页 |
| 1 PVS沉淀法 | 第26-27页 |
| 2 DiI-LDL荧光法 | 第27页 |
| (七) 人类LDLR基因表达 | 第27页 |
| (八) 姜黄素最佳实验浓度选择 | 第27-29页 |
| (九) 姜黄素对爪蟾卵母细胞存活率的影响 | 第29页 |
| (十) 姜黄素对人类LDLR基因表达的影响 | 第29-30页 |
| 四、 分析与讨论 | 第30-36页 |
| 五、 结论 | 第36-38页 |
| 六、 参考文献 | 第38-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 附照片 | 第42-46页 |
| 附: 文献综述 | 第46-58页 |
