中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一部分 | 第10-37页 |
概述 | 第10-11页 |
材料和方法 | 第11-23页 |
材料与仪器 | 第11-12页 |
方法 | 第12-23页 |
Calu-6细胞培养 | 第12-13页 |
pC53-SN3质粒和空载体对照质粒pCMV-neo的扩增 | 第13-15页 |
Calu-6细胞株的P53蛋白表达检测(免疫组化) | 第15-16页 |
SSCP法检测p53外显子突变 | 第16-19页 |
对Calu-6细胞p53第6外显子PCR扩增产物测序 | 第19页 |
Calu-6细胞转染 | 第19页 |
G418最适浓度选择 | 第19-20页 |
转染后质粒暂时表达与长期表达的检测 | 第20-21页 |
转染后细胞筛选 | 第21-22页 |
生长曲线绘制 | 第22页 |
集落形成实验 | 第22-23页 |
结果 | 第23-37页 |
Calu-6细胞形态 | 第23-24页 |
提取质粒与原质粒电泳结果比较 | 第24-25页 |
pC53-SN3质粒的BamHⅠ酶切图 | 第25-26页 |
CALU-6细胞株的P53蛋白表达检测免疫组化结果 | 第26-27页 |
PCR扩增的Calu-6与pC53-SN3中p53外显子 | 第27-28页 |
SSCP结果 | 第28-29页 |
测序结果 | 第29-33页 |
G418筛选过程中出现的细胞克隆 | 第33-34页 |
筛选细胞的稳定表达 | 第34-35页 |
细胞生长曲线 | 第35-36页 |
集落形成实验结果 | 第36-37页 |
第二部分 | 第37-51页 |
材料与方法 | 第37-42页 |
材料 | 第37页 |
方法 | 第37-42页 |
靶细胞的制备 | 第37页 |
自体树突状细胞的建立 | 第37-38页 |
非特异性杀伤细胞的建立 | 第38-39页 |
DC细胞的转染 | 第39页 |
非特异性和特异性杀伤力检测 | 第39-41页 |
混合淋巴细胞增殖反应 | 第41-42页 |
结果 | 第42-51页 |
DC的纯度、得率、形态和表面标记 | 第42-44页 |
转染后DC诱导混合淋巴细胞增殖反应 | 第44-46页 |
转染后DC细胞P53蛋白表达分析 | 第46页 |
杀伤实验结果 | 第46-51页 |
讨论 | 第51-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
缩略语 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-71页 |