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壬基酚降解酶的分离纯化及其表征研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
1 绪论第12-24页
   ·NP的概况及其降解性第12-18页
     ·NP的结构及其性质第12-13页
     ·NP的激素作用及危害第13-14页
     ·NP的生物降解性及其影响因素第14-18页
   ·NP的降解机理第18-22页
     ·烷基酚和酚类物质的微生物降解途径第19-21页
     ·壬基酚的微生物降解途径第21-22页
   ·本课题的提出和研究内容简介第22-24页
2 NP降解酶的分离纯化第24-46页
   ·实验材料第25-29页
     ·供试菌种第25-26页
     ·试剂第26-27页
     ·实验仪器第27-28页
     ·实验所需溶液的配制第28-29页
   ·实验方法第29-41页
     ·菌体发酵第29页
     ·粗酶液的制备第29页
     ·蛋白质含量的测定方法第29-31页
     ·酶活力的测定方法第31页
     ·硫酸铵分级盐析第31-33页
     ·透析脱盐第33页
     ·Sephadex G-200柱层析第33-35页
     ·样品的浓缩第35页
     ·DEAE-sepharose Fast Flow柱层析第35-37页
     ·电泳分析第37-41页
   ·实验结果与分析第41-44页
     ·粗酶液的制备第41-42页
     ·硫酸铵分级盐析第42页
     ·Sephadex G-200柱层析第42-43页
     ·DEAE-sepharose Fast Flow柱层析第43-44页
     ·酶的纯度及分子量测定第44页
   ·小结第44-46页
3NP降解酶的酶学性质第46-60页
   ·实验材料第46-47页
     ·主要试剂第46页
     ·实验仪器第46-47页
   ·实验方法第47-52页
     ·酶的最适pH第47-48页
     ·酶的pH稳定性第48-49页
     ·酶的最适反应温度第49-50页
     ·酶的热稳定性第50-51页
     ·酶的米氏常数Km的测定第51页
     ·金属离子对酶活性的影响第51-52页
     ·各种化合物对酶活性的影响第52页
   ·实验结果与讨论第52-58页
     ·酶的最适pH第52页
     ·酶的pH稳定性第52-53页
     ·酶的最适反应温度第53-54页
     ·酶的热稳定性第54页
     ·酶的米氏常数Km第54-55页
     ·金属离子对酶活性的影响第55页
     ·各种化合物对酶活性的影响第55-58页
   ·小结第58-60页
4NP降解途径的研究第60-71页
   ·实验材料第62-63页
     ·试剂第62页
     ·实验仪器第62页
     ·实验所需溶液的配制第62-63页
   ·实验方法第63-64页
     ·紫外可见分光光度法对NP的降解分析第63页
     ·气相色谱-质谱联用测定NP降解产物第63-64页
   ·实验结果与讨论第64-69页
     ·紫外可见分光光度法对NP的降解分析第64-65页
     ·气相色谱-质谱联用测定NP降解产物第65-68页
     ·NP降解途径的探讨第68-69页
   ·小结第69-71页
5 结论与建议第71-73页
   ·结论第71-72页
   ·建议第72-73页
参考文献第73-80页
附录Ⅰ 符号缩写第80-81页
附录Ⅱ 硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃)第81-82页
附录Ⅲ SEPHADEX G 型交联葡聚糖凝胶溶胀时间第82-83页
附录Ⅳ 缓冲溶液的配制方法第83-85页
致谢第85-86页
攻读硕士学位期间发表的论文及专利第86页

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