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多巴胺合成相关基因的表达与其空间距离关系的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
第一章 前言第9-17页
   ·细胞核空间结构研究进展第9-12页
     ·染色体构象捕获及其衍生技术第9-10页
     ·亚细胞核结构的研究第10-11页
     ·不同基因共享转录工厂的研究第11-12页
   ·荧光原位杂交原理与概述第12-13页
     ·原位杂交第12页
     ·荧光原位杂交第12页
     ·TSA 信号放大系统的工作原理第12-13页
   ·多巴胺相关知识的概述第13-16页
     ·多巴胺的生理作用第13-14页
     ·多巴胺的合成通路第14页
     ·多巴胺合成的相关基因第14-16页
   ·Th 和 Dbh 基因表达的调节途径第16页
   ·研究的内容和意义第16-17页
第二章 实验的可行性验证第17-26页
   ·实验材料和器材第17-18页
     ·细胞制备材料第17页
     ·DNA-FISH 材料第17页
     ·实验试剂第17-18页
     ·主要仪器第18页
   ·实验方法第18-22页
     ·细胞的培养第18-19页
     ·细胞分裂中期同步化第19-20页
     ·3D-DNA-FISH第20-22页
       ·BAC DNA 的分离和纯化第20页
       ·探针的制备第20-21页
       ·细胞的准备第21页
       ·DNA FISH 杂交第21-22页
     ·2D-DNA-FISH第22页
   ·探针的特异性验证第22-23页
     ·细胞分裂中期同步化第22-23页
     ·探针与棒状染色体的杂交第23页
   ·DNA-FISH 检测基因共定位第23-24页
   ·三色 DNA-FISH第24-25页
   ·实验讨论与小结第25-26页
第三章 小鼠 Neuro-2A 细胞中基因表达与空间距离的关系第26-32页
   ·实验材料与器材第26页
     ·基因表达相关试剂第26页
     ·实验仪器第26页
   ·TRIZOL 法提取 RNA、反转录以及 Q-PCR 的步骤第26-27页
   ·基因表达的变化第27-29页
     ·Neuro-2A 细胞中多巴胺合成相关基因的表达第27-28页
     ·基因表达的诱导第28-29页
   ·基因空间距离的变化第29-31页
     ·肿瘤细胞 FISH 背景较高第29-30页
     ·Th 与 Gch1 在空间上相互靠近第30-31页
     ·基因表达的变化与空间距离的关系第31页
   ·实验讨论与小结第31-32页
第四章 大鼠 PC12 细胞中基因表达与空间距离的关系第32-44页
   ·实验材料与器材第32-34页
     ·引物的合成与测序第32页
     ·菌株、细胞株和质粒第32-33页
     ·细胞培养与转染第33页
     ·分子生物学相关耗材第33页
     ·免疫荧光及 FISH 相关耗材第33页
     ·细菌培养相关耗材第33页
     ·实验仪器第33-34页
   ·实验方法第34-36页
     ·免疫荧光第34页
     ·载体的构建第34-35页
     ·真核细胞转染第35页
     ·生物素标记探针与 TSA 信号放大系统第35-36页
   ·PC12 细胞系的基因表达第36-37页
     ·PC12 细胞系中多巴胺合成相关基因的表达第36-37页
     ·酪氨酸羟化酶在 PC12 细胞系中的分布第37页
   ·Etv1 的过表达与敲低第37-40页
     ·真核过表达载体 pcDNA3.1-Etv1 成功构建第37-38页
     ·PC12 细胞中 Etv1 的过表达及对通路基因表达的影响第38-39页
     ·PC12 细胞中 Etv1 的敲低及对通路基因表达的影响第39-40页
   ·腺苷酸环化酶的激活和抑制对通路基因表达的影响第40-42页
     ·PC12 细胞系 FSK 可诱导相关基因表达变化第40-41页
     ·PC12 细胞系 MDL12,330A 处理条件的探索第41页
     ·激活和抑制腺苷酸环化酶对通路基因表达的影响第41-42页
   ·大鼠 Th 和 Dbh 探针的制备第42-43页
   ·实验讨论与小结第43-44页
第五章 结论第44-45页
参考文献第45-49页
附录第49-53页
致谢第53页

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