摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-17页 |
·细胞核空间结构研究进展 | 第9-12页 |
·染色体构象捕获及其衍生技术 | 第9-10页 |
·亚细胞核结构的研究 | 第10-11页 |
·不同基因共享转录工厂的研究 | 第11-12页 |
·荧光原位杂交原理与概述 | 第12-13页 |
·原位杂交 | 第12页 |
·荧光原位杂交 | 第12页 |
·TSA 信号放大系统的工作原理 | 第12-13页 |
·多巴胺相关知识的概述 | 第13-16页 |
·多巴胺的生理作用 | 第13-14页 |
·多巴胺的合成通路 | 第14页 |
·多巴胺合成的相关基因 | 第14-16页 |
·Th 和 Dbh 基因表达的调节途径 | 第16页 |
·研究的内容和意义 | 第16-17页 |
第二章 实验的可行性验证 | 第17-26页 |
·实验材料和器材 | 第17-18页 |
·细胞制备材料 | 第17页 |
·DNA-FISH 材料 | 第17页 |
·实验试剂 | 第17-18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-22页 |
·细胞的培养 | 第18-19页 |
·细胞分裂中期同步化 | 第19-20页 |
·3D-DNA-FISH | 第20-22页 |
·BAC DNA 的分离和纯化 | 第20页 |
·探针的制备 | 第20-21页 |
·细胞的准备 | 第21页 |
·DNA FISH 杂交 | 第21-22页 |
·2D-DNA-FISH | 第22页 |
·探针的特异性验证 | 第22-23页 |
·细胞分裂中期同步化 | 第22-23页 |
·探针与棒状染色体的杂交 | 第23页 |
·DNA-FISH 检测基因共定位 | 第23-24页 |
·三色 DNA-FISH | 第24-25页 |
·实验讨论与小结 | 第25-26页 |
第三章 小鼠 Neuro-2A 细胞中基因表达与空间距离的关系 | 第26-32页 |
·实验材料与器材 | 第26页 |
·基因表达相关试剂 | 第26页 |
·实验仪器 | 第26页 |
·TRIZOL 法提取 RNA、反转录以及 Q-PCR 的步骤 | 第26-27页 |
·基因表达的变化 | 第27-29页 |
·Neuro-2A 细胞中多巴胺合成相关基因的表达 | 第27-28页 |
·基因表达的诱导 | 第28-29页 |
·基因空间距离的变化 | 第29-31页 |
·肿瘤细胞 FISH 背景较高 | 第29-30页 |
·Th 与 Gch1 在空间上相互靠近 | 第30-31页 |
·基因表达的变化与空间距离的关系 | 第31页 |
·实验讨论与小结 | 第31-32页 |
第四章 大鼠 PC12 细胞中基因表达与空间距离的关系 | 第32-44页 |
·实验材料与器材 | 第32-34页 |
·引物的合成与测序 | 第32页 |
·菌株、细胞株和质粒 | 第32-33页 |
·细胞培养与转染 | 第33页 |
·分子生物学相关耗材 | 第33页 |
·免疫荧光及 FISH 相关耗材 | 第33页 |
·细菌培养相关耗材 | 第33页 |
·实验仪器 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-36页 |
·免疫荧光 | 第34页 |
·载体的构建 | 第34-35页 |
·真核细胞转染 | 第35页 |
·生物素标记探针与 TSA 信号放大系统 | 第35-36页 |
·PC12 细胞系的基因表达 | 第36-37页 |
·PC12 细胞系中多巴胺合成相关基因的表达 | 第36-37页 |
·酪氨酸羟化酶在 PC12 细胞系中的分布 | 第37页 |
·Etv1 的过表达与敲低 | 第37-40页 |
·真核过表达载体 pcDNA3.1-Etv1 成功构建 | 第37-38页 |
·PC12 细胞中 Etv1 的过表达及对通路基因表达的影响 | 第38-39页 |
·PC12 细胞中 Etv1 的敲低及对通路基因表达的影响 | 第39-40页 |
·腺苷酸环化酶的激活和抑制对通路基因表达的影响 | 第40-42页 |
·PC12 细胞系 FSK 可诱导相关基因表达变化 | 第40-41页 |
·PC12 细胞系 MDL12,330A 处理条件的探索 | 第41页 |
·激活和抑制腺苷酸环化酶对通路基因表达的影响 | 第41-42页 |
·大鼠 Th 和 Dbh 探针的制备 | 第42-43页 |
·实验讨论与小结 | 第43-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
附录 | 第49-53页 |
致谢 | 第53页 |