专业名词缩写中英文对照简表 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
前言 | 第12-28页 |
1 转录激活因子AP-2基因家族 | 第12-17页 |
·转录激活因子AP-2基因家族的结构特点 | 第12-14页 |
·转录激活因子AP-2γ的生物学功能 | 第14-15页 |
·AP-2蛋白家族与乳腺癌的关系 | 第15-17页 |
2 染色质免疫沉淀技术(ChIP) | 第17-20页 |
·ChIP技术的原理 | 第18-19页 |
·在反式作用因子的靶序列的研究领域 | 第19-20页 |
3 受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 precursor,ErbB2)的简介 | 第20-22页 |
·ErbB2的分布、定位与结构 | 第20页 |
·erbB2与乳腺癌 | 第20-21页 |
·erbB2信号途径与乳腺癌 | 第21-22页 |
4 神经-钙粘素(N-cadherin,CDH2)的简介 | 第22-24页 |
·N-cadherin的分布、定位与结构 | 第23页 |
·N-cadherin的分子生物学性能 | 第23-24页 |
·N-cadherin与乳腺瘤 | 第24页 |
5 乙酰肝素酶(Heparanase,HPSE)的简介 | 第24-27页 |
·HPSE基因的分布、定位与结构 | 第24-25页 |
·HPSE的分子生物学性能 | 第25-26页 |
·HPSE与肿瘤转移 | 第26-27页 |
6 免疫球蛋白超家族成员11(Immunoglobulin superfamily member 11,IGSF11)的简介 | 第27-28页 |
第一部分 材料与方法 | 第28-46页 |
1 材料 | 第28-34页 |
·菌种和细胞株 | 第28页 |
·载体和工具酶 | 第28页 |
·抗体 | 第28页 |
·试剂盒 | 第28页 |
·其它试剂 | 第28-29页 |
·所需溶液 | 第29-32页 |
·siRNA干扰序列 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32-34页 |
2 实验方法 | 第34-46页 |
·细胞培养 | 第34-35页 |
·免疫沉淀和Western Blot检测 | 第35-37页 |
·染色质免疫沉淀(ChIP) | 第37-38页 |
·AP-2γ-ChIP-PCR扩增实验 | 第38-39页 |
·野生型和突变型pTAL-ChIP-DNA载体的构建及寡核苷酸合成 | 第39-41页 |
·细胞转染和萤光素酶试验(Luciferase assay) | 第41-42页 |
·RNA抽提和相对定量RT-PCR | 第42-44页 |
·电泳迁移率变动分析试验(EMSA) | 第44-45页 |
·统计学分析 | 第45-46页 |
第二部分 结果分析 | 第46-55页 |
1 pUC19-ChIP-DNA质粒的测序结果及分析 | 第46-47页 |
2 AP-2γ-ChIP-PCR实验检验AP-2γ转录因子与R3-36,R4-28,R1-15片段结合的特异性 | 第47-48页 |
3 AP-2γ转录因子影响了R3-1,R3-36,R4-28,R1-15片段的转录活性 | 第48-51页 |
4 AP-2γ-ChIP-DNA片段上AP-2γ的潜在结合位点的鉴定 | 第51-52页 |
5 AP-2γ转录因子影响了ErbB2,CDH2,IGS11l和HPSE基因的mRNA的转录水平 | 第52-53页 |
6 AP-2γ调控ErbB2,CDH2,IGSF11和HPSE的蛋白表达 | 第53-55页 |
第三部分 讨论 | 第55-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-70页 |