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转RCH10和AGLU1基因水稻后代的分子细胞学检测及抗纹枯病的相关研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 水稻抗病反应及水稻抗病基因工程第9-27页
 1 植物的抗病反应第9-14页
   ·植物的抗病机制第9-11页
   ·植物的系统获得抗性及其产生防卫反应过程第11-12页
   ·抗性相关基因及病原无毒基因的克隆与研究第12-14页
     ·抗病基因(R)第12-13页
     ·无毒基因(Avr)第13-14页
     ·防卫基因第14页
 2 水稻抗病研究进展第14-19页
   ·水稻抗病基因的克隆和研究第14-16页
   ·水稻防卫反应和PR蛋白第16-18页
     ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的生化特性第17页
     ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶在植物体内的诱导表达第17-18页
     ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶与植物的防御功能第18页
   ·水稻抗病基因工程第18-19页
 3 水稻纹枯病及抗纹枯病转基因的研究第19-26页
   ·水稻纹枯病病原菌的研究第19-21页
     ·分类地位第19页
     ·形态特点第19-20页
     ·寄主范围第20页
     ·发病症状及规律第20-21页
   ·水稻纹枯病菌致病机理第21-22页
   ·纹枯病转基因抗病研究第22-26页
     ·转化植物自身的几丁质酶和葡聚糖酶等基因第22-24页
     ·转化生防菌中的抗纹枯病基因第24-26页
 本研究的意义、目的和主要研究内容第26-27页
第二章 转基因水稻T_6代遗传稳定性及纹枯病抗性分析第27-36页
 1 材料和方法第27-30页
   ·材料第27页
     ·水稻第27页
     ·纹枯病菌株第27页
   ·方法第27-30页
     ·转基因水稻PCR分析第27-28页
     ·转基因水稻Northern分析第28-29页
     ·转基因水稻的组织化学染色第29-30页
     ·转基因水稻纹枯病抗性鉴定第30页
   ·统计分析第30页
 2 结果与分析第30-35页
   ·T_6代转基因水稻植株外源基因的遗传鉴定第30-31页
   ·T_6代转基因水稻植株外源基因表达的鉴定第31页
   ·转基因水稻植株的GUS组织化学染色第31-32页
   ·T_6代转基因水稻植株的纹枯病抗性第32-35页
 3 讨论第35-36页
第三章 RCH10和AGLU1的酶活性测定和亚细胞定位第36-43页
 1 材料和方法第36-39页
   ·材料第36页
     ·水稻材料第36页
     ·胶体金探针第36页
     ·RCH10和AGLU1的多克隆抗体第36页
   ·方法第36-39页
     ·粗酶液的提取第36页
     ·几丁质酶活性测定第36-37页
     ·β-1,3-葡聚糖酶活性的测定第37-38页
     ·胶体金免疫标记方法第38-39页
 2 结果与分析第39-41页
   ·T_6代转基因水稻中几丁质酶和葡聚糖酶的活力第39-40页
   ·RCH10和AGLU1在转基因植株中的亚细胞定位第40-41页
 3 讨论第41-43页
第四章 荧光显微观察台盼蓝、卡拉唑黑E差异染色水稻叶鞘内、外部纹枯菌菌丝体方法的建立第43-55页
 1 材料和方法第43-45页
   ·材料第43-44页
     ·水稻培养第43页
     ·纹枯菌菌株及培养第43页
     ·接种纹枯菌的水稻叶鞘第43页
     ·载玻片上接种培养纹枯菌第43-44页
   ·方法第44-45页
     ·荧光增白剂染色第44页
     ·苯胺蓝、台盼蓝和卡拉唑黑E染色第44页
     ·荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察第44-45页
 2 结果第45-53页
   ·确定以水稻叶鞘内表面作为接种位点和光学显微观察位点第45-46页
   ·确定用未成熟纹枯菌菌核接种水稻叶鞘第46页
   ·荧光增白剂染色侵染水稻的纹枯菌第46-47页
   ·苯胺蓝、台盼蓝和卡拉唑黑E分别染色在载玻片上生长的纹枯菌菌丝体第47-50页
   ·苯胺蓝、台盼蓝和卡拉唑黑E分别染色侵染水稻叶鞘的纹枯菌菌丝体第50-53页
 3 讨论第53-55页
参考文献第55-66页
附录第66-67页
致谢第67-68页
个人简介第68页

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