中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1. 前言 | 第11-23页 |
·植物中的MAPK | 第11-13页 |
·植物MAPK 级联途径(MAPK cascades) | 第13-14页 |
·MAPK 级联途径在环境胁迫中的信号转导作用 | 第14-16页 |
·MAPK 级联途径在非生物胁迫中的信号转导作用 | 第14-15页 |
·MAPK 级联途径在生物胁迫中的信号转导作用 | 第15-16页 |
·MAPK 在激素信号传递中的作用 | 第16-19页 |
·MAPK 在生长素信号传递中的作用 | 第16-17页 |
·MAPK 在ABA 信号传递中的作用 | 第17-18页 |
·MAPK 在乙烯信号传递中的作用 | 第18-19页 |
·MAPK 在赤霉素信号传递中的作用 | 第19页 |
·MAPK 在水杨酸信号传递中的作用 | 第19页 |
·MAPKs 与信号分子之间的相互作用 | 第19-21页 |
·MAPK 级联途径信号转导的特异性 | 第21-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23页 |
2. 材料与方法 | 第23-34页 |
·试验材料 | 第23-25页 |
·植物材料 | 第23-24页 |
·植物材料培养与处理 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24-25页 |
·酶及生化试剂 | 第25页 |
·PCR 引物 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-34页 |
·植物材料总RNA 的提取 | 第25页 |
·反转录cDNA 第一条链的合成 | 第25页 |
·cDNA 纯化(用于5’RACE) | 第25-26页 |
·对cDNA 进行末端加尾(用于5’RACE) | 第26页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第26-27页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第27-28页 |
·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第28-29页 |
·凝胶电泳中DNA 片段的回收 | 第29页 |
·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第29页 |
·DNA 序列测定 | 第29页 |
·MhMAPK 基因正义表达载体的构建 | 第29-30页 |
·MhMAPK 基因反义表达载体的构建 | 第30-31页 |
·pBI121-MhMAPK-GFP 表达载体的构建 | 第31-32页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
·实时荧光定量PCR 分析 | 第33页 |
·MAPK 活性的测定 | 第33-34页 |
·NO 含量的测定 | 第34页 |
·抗氧化酶活性及活性氧的测定 | 第34页 |
3. 结果与分析 | 第34-59页 |
·平邑甜茶MhMAPK 基因克隆与序列分析 | 第34-41页 |
·MhMAPK 基因的分离 | 第34-37页 |
·平邑甜茶MhMAPK 基因的序列分析 | 第37-41页 |
·MhMAPK 与其他MAPK 基因的聚类分析 | 第41页 |
·平邑甜茶MhMAPK 编码蛋白的特性分析 | 第41-43页 |
·MhMAPK 基因编码蛋白的氨基酸分析 | 第41-42页 |
·MhMAPK 基因编码的蛋白结构域分析 | 第42-43页 |
·MhMAPK 基因编码的蛋白疏水性分析 | 第43页 |
·平邑甜茶MhMAPK 的亚细胞定位 | 第43-45页 |
·表达载体pBI121-MhMAPK-GFP 的构建 | 第43页 |
·MhMAPK 在洋葱表皮中的亚细胞定位 | 第43-45页 |
·平邑甜茶MhMAPK 表达载体构建 | 第45-47页 |
·转基因烟草正义表达载体pBI121-MhMAPK 的构建 | 第45-46页 |
·反义表达载体pBI121-anti-MhMAPK 的构建 | 第46-47页 |
·平邑甜茶MhMAPK 对逆境胁迫的响应 | 第47-59页 |
·平邑甜茶MhMAPK 基因的表达分析 | 第47-50页 |
·平邑甜茶MAPK 蛋白的活化特性分析 | 第50-53页 |
·铜、镉胁迫对平邑甜茶内源NO 含量变化的影响 | 第53-55页 |
·NO 对铜、镉胁迫下平邑甜茶幼苗活性氧代谢的影响 | 第55-59页 |
4. 讨论 | 第59-62页 |
·平邑甜茶MhMAPK 基因的克隆与表达特性分析 | 第59-60页 |
·NO 诱导的MAPK 途径在平邑甜茶对重金属胁迫反应中的作用 | 第60-62页 |
5. 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士学位期间完成论文情况 | 第75页 |