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拟南芥种子发育过程中SHB1基因的表达与功能分析

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1 引言第13-31页
   ·被子植物种子的发育第13-17页
     ·被子植物胚的发育第14-15页
     ·被子植物胚乳的发育第15-16页
     ·被子植物种皮的发育第16-17页
   ·影响种子发育的因素第17-22页
     ·影响胚发育的因素第17-18页
     ·影响胚乳发育的因素第18-19页
     ·无融合生殖与种子发育第19-20页
     ·基因组印迹与种子发育第20-22页
   ·控制种子大小的遗传机制第22-27页
     ·IKU 途径对种子大小的控制第22-23页
     ·TTG2 途径对种子大小的控制第23-24页
     ·IKU 途径和TTG2 途径互作控制种子的大小第24-25页
     ·AP2 途径对种子大小的控制第25-26页
     ·控制种子大小的模型第26-27页
   ·细胞数目和细胞大小决定种子的大小第27-28页
   ·SHB1 基因第28-30页
     ·SHB1 基因的克隆第28-29页
     ·SHB1 基因的定位与已知功能第29-30页
   ·本研究的目的与意义第30-31页
2 材料与方法第31-53页
   ·实验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·菌株与质粒第31页
     ·酶及生化试剂第31页
     ·PCR引物第31-32页
   ·实验方法第32-53页
     ·植物基因组DNA 的提取第32-33页
     ·植物组织总RNA 的提取及检测第33-35页
     ·反转录cDNA 第一链的合成第35页
     ·PCR 扩增第35-36页
     ·连接反应第36页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第36-37页
     ·碱法小量质粒DNA 的提取第37-38页
     ·质粒DNA 的酶切鉴定第38页
     ·DNA 序列测定第38-39页
     ·目的片段的回收第39页
     ·根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备与转化第39-40页
     ·pSHB1::GUS 表达载体的构建第40-41页
     ·拟南芥的栽培、转化及分析第41-42页
     ·微分干涉差显微照相分析第42-44页
     ·原位杂交第44-50页
     ·GUS 染色分析第50-51页
     ·花粉粒体外萌发实验第51页
     ·半薄切片的制作第51-53页
3 结果与分析第53-69页
   ·shb1-D 与shb1-L 突变体种子的表型分析第53-54页
   ·突变体成熟胚细胞大小与细胞数目的分析第54-59页
     ·shb1-D 成熟胚细胞大小与细胞数目的分析第54-56页
     ·shb1-L 成熟胚细胞大小与细胞数目的分析第56-59页
   ·突变体种子发育进程的分析第59-63页
     ·shb1-D 突变体种子的发育时期延迟第59-61页
     ·shb1-L 突变体种子发育时期与野生型基本一致第61-63页
   ·SHB1 基因在不同器官中的表达分析第63-64页
   ·SHB1 基因在种子中的时空表达分析第64-66页
   ·shb1-D 突变体胚乳的细胞化延迟第66-69页
     ·授粉后shb1-D 突变体胚乳的细胞化延迟第66-67页
     ·胚发育shb1-D 突变体胚乳的细胞化延迟第67-69页
4 讨论第69-73页
   ·SHB1基因促进细胞的分裂与扩张第69-70页
   ·shb1-L突变体表型不明显可能与存在同源基因有关第70页
   ·SHB1基因过量表达使种子的发育时间延长第70页
   ·SHB1基因在拟南芥植株的多种器官中表达第70-71页
   ·胚乳细胞化延迟使shb1-D突变体种子变大第71页
   ·SHB1基因通过IKU途径参与对种子大小的调控第71-73页
5 结论第73-74页
参考文献第74-83页
附录第83-90页
攻读学位期间发表论文情况第90-91页
致谢第91页

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