| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 引言 | 第12页 |
| ·牛呼吸道合胞体病毒简介 | 第12-19页 |
| ·牛呼吸道合胞体病毒的形态与分子特征 | 第12页 |
| ·BRSV 编码病毒蛋白概述 | 第12-15页 |
| ·BRSV 的流行病学 | 第15-16页 |
| ·BRSV 的诊断 | 第16页 |
| ·牛呼吸道合胞体病毒疫苗研究进展 | 第16-19页 |
| ·亚单位疫苗 | 第16-18页 |
| ·基因工程疫苗 | 第18页 |
| ·核酸疫苗 | 第18-19页 |
| ·病毒活载体疫苗的研究进展 | 第19-23页 |
| ·腺病毒活载体 | 第19页 |
| ·痘病毒活载体 | 第19-20页 |
| ·疱疹病毒活载体 | 第20-23页 |
| ·牛疱疹病毒活载体 | 第20页 |
| ·BHV-1 作为活病毒载体的优势 | 第20-21页 |
| ·BHV-1 活病毒载体研究中遇到的问题 | 第21页 |
| ·构建 BHV-1 活载体病毒的策略 | 第21-22页 |
| ·BHV-1 活载体病毒的应用 | 第22-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 表达BRSV G 基因的重组BHV-1 的构建与鉴定 | 第24-36页 |
| ·材料和方法 | 第25-28页 |
| ·毒株、细胞与质粒 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·血清及标记抗体 | 第25页 |
| ·BHV-1 基因组 DNA 的制备 | 第25页 |
| ·转移载体的构建 | 第25-26页 |
| ·PUC18 TK/G+转移载体质粒的大量提取与纯化 | 第26页 |
| ·牛鼻甲细胞培养与病毒 DNA 转染 | 第26-27页 |
| ·重组病毒的筛选与纯化 | 第27页 |
| ·重组病毒的PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·重组病毒TCID50 的测定 | 第27-28页 |
| ·重组病毒 BHV-1/TK~—/G~+中 G 基因表达的检测 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-34页 |
| ·转移载体的构建及鉴定 | 第28-30页 |
| ·重组病毒的筛选 | 第30页 |
| ·重组病毒的PCR 鉴定 | 第30页 |
| ·重组病毒的序列测定结果 | 第30-32页 |
| ·重组病毒的 TCID50的测定 | 第32页 |
| ·重组病毒G 基因的表达检测结果 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 牛呼吸道合胞体病毒G 蛋白的截短表达与鉴定 | 第36-44页 |
| ·材料和方法 | 第37-39页 |
| ·基因、菌种和质粒 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·引物设计与合成 | 第37-38页 |
| ·G 基因表达载体的构建与鉴定 | 第38页 |
| ·G 基因的表达 | 第38页 |
| ·表达产物的分析与纯化 | 第38页 |
| ·表达产物的Western blot 鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白G 间接ELISA 检测牛血清样品试验 | 第39页 |
| ·用重组蛋白G 检测牛血清样品的免疫印迹试验 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·G 基因两个片段的扩增和克隆 | 第39页 |
| ·重组蛋白在表达菌中的存在形式及表达产物的纯化 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白抗原性的Western blot 鉴定 | 第40-41页 |
| ·间接ELISA 与免疫印迹试验检测牛血清样品结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 附录 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
