| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-15页 |
| ·果蝇研究现状 | 第8-12页 |
| ·果蝇简介 | 第8-10页 |
| ·果蝇研究现状 | 第10页 |
| ·获得果蝇突变体的常规操作 | 第10-12页 |
| ·核糖体及其重要作用蛋白LePA概述 | 第12-15页 |
| ·核糖体简介 | 第12-13页 |
| ·核糖体与蛋白质生物合成 | 第13-14页 |
| ·LepA简介 | 第14-15页 |
| 2 材料和方法 | 第15-38页 |
| ·材料,试剂与仪器 | 第15-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·购买试剂 | 第15-17页 |
| ·自备试剂 | 第17-19页 |
| ·仪器 | 第19-21页 |
| ·实验方案 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-38页 |
| ·Δwaw,waw,gfp基因的PCR扩增 | 第22-25页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·Δwaw、waw过表达,带GFP以及在大肠杆菌中表达所需片段的PCR | 第23-24页 |
| ·Δwaw、waw过表达,带GFP以及在大肠杆菌中表达所需片段的PCR产物的回收和酶切鉴定 | 第24-25页 |
| ·pTARG-Δwaw、pUAST-waw、pUAST-waw-gfp、pET22b-waw、pET28a-waw、pGEX-waw、pMAL-waw质粒的构建 | 第25-29页 |
| ·pTARG-Δwaw质粒的构建 | 第25-28页 |
| ·pUAST-waw、pUAST-waw-gfp、pET22b-waw、pET28A-waw、pGEX-waw、pMAL-waw的构建 | 第28-29页 |
| ·体外Waw的表达与纯化 | 第29-33页 |
| ·体外Waw的表达 | 第29-30页 |
| ·Waw用pET22b-waw,pET28a-waw表达后纯化 | 第30-31页 |
| ·用pGEX-waw质粒表达Waw | 第31-32页 |
| ·用pMAL-waw质粒表达Waw | 第32-33页 |
| ·阴离子交换柱的使用 | 第33页 |
| ·分子筛的使用 | 第33页 |
| ·体内实验 | 第33-38页 |
| ·基因打靶 | 第33-36页 |
| ·P因子跳出 | 第36-37页 |
| ·waw体内过表达 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·载体鉴定实验 | 第38-41页 |
| ·菌落PCR和酶切鉴定转化后的克隆中是否带有Δwaw片段 | 第38-39页 |
| ·pUAST-waw酶切检测、pUAST-waw-gfp的菌落PCR | 第39页 |
| ·pET22b-waw,pET28A-waw,pGEX-waw,pMAL-waw菌落PCR检测 | 第39-41页 |
| ·体内基因打靶和过量表达的实验 | 第41页 |
| ·基因打靶 | 第41页 |
| ·体内过表达实验 | 第41页 |
| ·Waw大肠杆菌中表达的研究 | 第41-46页 |
| ·用pET22b-waw来表达纯化蛋白 | 第41-45页 |
| ·pET28a-waw、pGEX-waw、pMAL-waw为质粒来外源表达Waw | 第45-46页 |
| ·P因子跳出方法获得waw突变的果蝇 | 第46-49页 |
| 4.讨论 | 第49-53页 |
| ·Waw蛋白提取条件的优化 | 第49-50页 |
| ·突变体和过表达 | 第50-51页 |
| ·P因子跳出得到突变体果蝇 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
