摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第一章 细菌中 TRAP 转运系统的研究进展 | 第9-30页 |
·引言 | 第9页 |
·TRAP 的含义 | 第9-11页 |
·ESR 的含义和功能 | 第11-15页 |
·TRAP 转运体的功能特征 | 第15-18页 |
·TRAP 的转运机制 | 第18-20页 |
·TRAP 转运体基因结构和亚基组成的多样性 | 第20-21页 |
·TRAP 的转运体家族的组成 | 第21-26页 |
·其它相关的TRAP 转运体 | 第26-28页 |
·结论 | 第28-29页 |
·本课题的研究意义 | 第29-30页 |
第二章 GtrA 调控matPQMAB 操纵子的研究 | 第30-54页 |
1 材料与方法 | 第30-43页 |
·植株材料 | 第30-31页 |
·菌株 | 第31-32页 |
·培养基、抗生素及菌体的培养 | 第32页 |
·酶及生化试剂 | 第32页 |
·质粒制备及转化 | 第32-34页 |
·DNA 片段的纯化回收 | 第34-35页 |
·竞争性结瘤的测定 | 第35页 |
·固氮酶活的测定 | 第35-36页 |
·生长曲线的测定 | 第36页 |
·三亲本杂交实验 | 第36页 |
·噬菌体转导实验 | 第36-37页 |
·蛋白表达载体的诱导表达和纯化 | 第37-38页 |
·NTA 树脂的再生 | 第38-39页 |
·凝胶阻滞实验 | 第39-43页 |
2 结果与讨论 | 第43-53页 |
·gtrA 与matPQMAB 基因簇的序列分析 | 第43-44页 |
·突变体的构建 | 第44页 |
·gtrA 与matPQMAB 操纵子对共生的影响 | 第44-48页 |
·竞争性结瘤实验 | 第48-49页 |
·matPQMAB 操纵子参与丙二酸盐的吸收和利用 | 第49-51页 |
·凝胶阻滞实验 | 第51-53页 |
3 本章小结 | 第53-54页 |
第三章 matPQMAB 操纵子中matB 基因的功能研究 | 第54-62页 |
1 材料与方法 | 第54-56页 |
·菌株与质粒 | 第54-55页 |
·培养基、抗生素及菌体的培养 | 第55页 |
·MatB 与MatA 蛋白的诱导表达与纯化浓缩 | 第55页 |
·MatB 蛋白酶活力单位的测定 | 第55页 |
·MatB 的米氏常数(km)和最大反应速率(Vmax)的测定 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-61页 |
·MatB 表达蛋白的检测 | 第56页 |
·MatB 表达蛋白的纯化与浓缩 | 第56-58页 |
·MatB 蛋白的酶活性检测 | 第58-59页 |
·MatA 蛋白的纯化与浓缩 | 第59-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
总结与展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
附录 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
作者简介 | 第79-80页 |
附件 | 第80页 |