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苜蓿中华根瘤菌中参与丙二酸代谢的matPQMAB操纵子的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 细菌中 TRAP 转运系统的研究进展第9-30页
   ·引言第9页
   ·TRAP 的含义第9-11页
   ·ESR 的含义和功能第11-15页
   ·TRAP 转运体的功能特征第15-18页
   ·TRAP 的转运机制第18-20页
   ·TRAP 转运体基因结构和亚基组成的多样性第20-21页
   ·TRAP 的转运体家族的组成第21-26页
   ·其它相关的TRAP 转运体第26-28页
   ·结论第28-29页
   ·本课题的研究意义第29-30页
第二章 GtrA 调控matPQMAB 操纵子的研究第30-54页
 1 材料与方法第30-43页
   ·植株材料第30-31页
   ·菌株第31-32页
   ·培养基、抗生素及菌体的培养第32页
   ·酶及生化试剂第32页
   ·质粒制备及转化第32-34页
   ·DNA 片段的纯化回收第34-35页
   ·竞争性结瘤的测定第35页
   ·固氮酶活的测定第35-36页
   ·生长曲线的测定第36页
   ·三亲本杂交实验第36页
   ·噬菌体转导实验第36-37页
   ·蛋白表达载体的诱导表达和纯化第37-38页
   ·NTA 树脂的再生第38-39页
   ·凝胶阻滞实验第39-43页
 2 结果与讨论第43-53页
   ·gtrA 与matPQMAB 基因簇的序列分析第43-44页
   ·突变体的构建第44页
   ·gtrA 与matPQMAB 操纵子对共生的影响第44-48页
   ·竞争性结瘤实验第48-49页
   ·matPQMAB 操纵子参与丙二酸盐的吸收和利用第49-51页
   ·凝胶阻滞实验第51-53页
 3 本章小结第53-54页
第三章 matPQMAB 操纵子中matB 基因的功能研究第54-62页
 1 材料与方法第54-56页
   ·菌株与质粒第54-55页
   ·培养基、抗生素及菌体的培养第55页
   ·MatB 与MatA 蛋白的诱导表达与纯化浓缩第55页
   ·MatB 蛋白酶活力单位的测定第55页
   ·MatB 的米氏常数(km)和最大反应速率(Vmax)的测定第55-56页
 2 结果与分析第56-61页
   ·MatB 表达蛋白的检测第56页
   ·MatB 表达蛋白的纯化与浓缩第56-58页
   ·MatB 蛋白的酶活性检测第58-59页
   ·MatA 蛋白的纯化与浓缩第59-61页
 3 讨论第61-62页
总结与展望第62-63页
参考文献第63-70页
附录第70-78页
致谢第78-79页
作者简介第79-80页
附件第80页

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