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甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育恢复基因Rfp的分子标记筛选与初步定位

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表第9-10页
1 文献综述第10-24页
   ·油菜杂种优势与利用途径第10页
   ·植物细胞质雄性不育与恢复基因的研究第10-15页
     ·细胞质雄性不育的特点第10-11页
     ·细胞质雄性不育的机理研究第11-13页
     ·细胞质雄性不育育性恢复基因的遗传第13页
     ·细胞质雄性不育育性恢复基因的作用机理研究第13-15页
   ·油菜波里马细胞质雄性不育(pol CMS)与恢复基因的研究第15-17页
     ·pol CMS的研究与育种应用第15-16页
     ·pol CMS的核质互作的遗传模式第16-17页
     ·pol CMS的恢复基因Rfp的研究第17页
   ·植物质量性状的定位第17-24页
     ·定位群体的构建第17-18页
     ·常用的分子标记及其应用第18-21页
       ·常用分子标记的种类第18-19页
       ·常用分子标记的在植物中的应用第19-21页
     ·利用分子生物学技术开发的新型分子标记第21-22页
       ·新型非特异分子标记SRAP的研究第21页
       ·新型中间型分子标记TRAP的研究第21页
       ·新型分子标记-----扩增共有序列遗传标记第21-22页
     ·油菜分子遗传连锁图谱的构建与基因定位第22-23页
     ·油菜与拟南芥的基因组比较作图与基因定位第23-24页
2 本研究的目的和意义第24-25页
3 材料与方法第25-34页
   ·实验材料第25页
   ·群体的构建与育性调查第25页
   ·单株叶片样品的取得与DNA的提取第25-26页
   ·DNA混合池的构建第26页
   ·AFLP分析第26-29页
     ·酶切与连接第26-27页
     ·预扩增与选择性扩增第27-29页
   ·AFLP选择性扩增产物的电泳检测第29-30页
   ·AFLP标记的克隆和SCAR转化第30-32页
     ·从PAGE上回收差异片段第30页
     ·目标片段的重新扩增及琼脂糖胶电泳第30页
     ·从琼脂糖胶中回收目标片段第30-31页
     ·连接反应第31页
     ·感受态细胞制备及质粒转化(电转化)第31-32页
     ·重组子PCR鉴定与测序第32页
     ·SCAR引物设计与PCR扩增第32页
   ·分子标记数据分析和图谱绘制第32-33页
   ·恢复基因(Rfp)连锁标记在TN连锁图谱上的整合第33页
   ·标记位点与拟南芥基因组序列相似性分析第33-34页
4 结果与分析第34-44页
   ·定位群体单株育性调查第34页
   ·AFLP引物筛选第34-35页
   ·与恢复基因连锁的AFLP标记第35-36页
   ·所得标记与Rfp的遗传距离确认与遗传图谱绘制第36-38页
   ·AFLP标记向SCAR标记转化第38-40页
     ·AFLP标记差异片段的回收与测序第39页
     ·SCAR引物设计第39-40页
   ·获得的SCAR标记在不同恢复系中的验证第40-41页
   ·恢复基因(Rfp)连锁标记在TN连锁图谱上的整合及其与拟南芥基因组序列的比较分析第41-44页
5.讨论第44-49页
   ·与恢复基因(Rfp)连锁标记的筛选第44页
   ·恢复基因(Rfp)定位结果的分析第44-45页
   ·AFLP标记向SCAR标记的转化第45-46页
   ·利用获得的标记辅助选择pol CMS优良恢复系第46页
   ·恢复基因(Rfp)连锁标记在TN连锁图谱上的整合及其与拟南芥基因组序列的比较分析第46-47页
   ·进一步定位恢复基因(Rfp)的设想第47-49页
参考文献第49-59页
附表:3个SCAR标记在90份亲本中的扩增情况第59-62页
致谢第62页

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