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牛结核病γ-干扰素诊断方法的优化与应用

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
前言第10-23页
 1 牛结核病的流行概况与危害第10-12页
 2 牛结核病的病原及流行病学第12-13页
   ·病原第12页
   ·牛结核病流行病学第12-13页
 3 致病机理研究第13-15页
 4 机体抗牛分枝杆菌感染的免疫机理第15-16页
 5 牛结核病诊断方法研究进展第16-21页
   ·临床诊断第16-17页
   ·细菌学检查第17页
   ·结核菌素皮内试验第17-18页
   ·ELISA试验第18-19页
   ·聚合酶链反应第19-20页
   ·淋巴细胞转化试验第20页
   ·菌体成分检测法第20页
   ·γ-干扰素试验第20-21页
 2.立题依据及其意义第21-23页
第一章:牛鼻拭子细菌分离培养与细菌抗酸染色鉴定第23-28页
 1 材料与方法第23-24页
   ·试验材料第23页
   ·试验方法第23-24页
     ·细菌的分离培养第23-24页
     ·细菌抗酸染色第24页
 2 结果与分析第24-26页
 3.讨论第26-28页
第二章 PPD-ELISA检测牛结核方法的建立与应用第28-38页
 1 材料与方法第28-31页
   ·试验材料第28页
   ·试验器材第28页
   ·ELISA试验主要溶液的配置第28-29页
   ·牛结核病间接ELISA方法的建立第29-31页
     ·草分枝杆菌的培养第29页
     ·草分枝杆菌吸收抗原的制备第29页
     ·草吸抗原的检验第29页
     ·最适抗原包被浓度与血清最佳稀释度的确定第29页
     ·牛结核PPD-ELISA检测最佳反应时间的选择第29-30页
     ·确定ELISA试验阳性临界值第30页
     ·灵敏度试验第30页
     ·特异性试验第30页
     ·重复性试验第30页
     ·敏感性、特异性和符合率的计算第30-31页
   ·血清学调查第31页
 2 结果与分析第31-36页
   ·牛结核病间接ELISA试验各反应条件的确定第31-36页
     ·兔抗牛酶标抗体工作浓度的确定第31页
     ·最适抗原包被浓度与血清最佳稀释度的确定第31-32页
     ·牛结核PPD-ELISA检测最佳反应时间的确定第32-33页
     ·EL I SA临界值的确定第33页
     ·牛结核ELISA检测步骤第33-34页
     ·建立ELISA方法的敏感性、特异性、重复性试验结果第34页
     ·建立的ELISA对不同牛场进行牛结核病血清学初步调查结果第34页
     ·ELISA与TST检测结果比较第34-36页
 3.小结第36页
 4 讨论第36-38页
第三章 牛γ干扰素(IFN-γ)ELISA诊断抗原的纯化及方法应用第38-46页
 1 材料与方法第38-41页
   ·试验材料第38页
   ·试验方法第38-41页
     ·草分支杆菌菌体抗原的制备第38-39页
     ·兔抗草分枝杆菌抗体的制备第39页
     ·亲和抗原的制备第39-40页
     ·临床样本采集及预处理第40页
     ·牛γ-干扰素ELISA检测方法第40页
     ·结果判定第40-41页
     ·敏感性、特异性和符合率的计算第41页
 2 结果第41-43页
   ·PPD亲和抗原的制备第41页
     ·兔抗草分枝杆菌免疫球蛋白的偶联率的测定第41页
     ·PPD兔抗草分枝杆菌杭体亲和层析结果第41页
   ·三种检测牛结核病方法的比较第41-43页
     ·牛γ-干扰素ELISA、TST检测奶牛结核病的结果比较第41-42页
     ·牛γ-干扰素ELISA检测、细菌抗酸染色检测奶牛结核病的结果比较第42页
     ·PPD-ELISA'、牛γ-干扰素ELISA检测奶牛结核病的结果比较第42页
     ·三种抗原刺激的牛γ-干扰素ELISA检测结果第42-43页
 3 讨论第43-46页
第四章 结论第46-47页
参考文献第47-54页
英文缩写第54-56页
附录第56-58页
致谢第58-59页
作者简介第59页

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