| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写表 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-32页 |
| 1 启动子研究 | 第11-23页 |
| ·启动子的概念 | 第11页 |
| ·植物启动子的基本结构及功能 | 第11-14页 |
| ·启动子的分类 | 第14-17页 |
| ·高等植物基因组织特异性启动子的类型 | 第17-23页 |
| 2 启动子的研究方法 | 第23-30页 |
| ·克隆的方法 | 第23-27页 |
| ·启动子功能和结构研究的策略 | 第27-30页 |
| 3 组织特异性启动子研究的重要性 | 第30-31页 |
| 4 本课题研究的目的意义 | 第31-32页 |
| 第二章 菊花泛素延伸蛋白基因(DgUEP)启动子的克隆和分析 | 第32-50页 |
| 1 材料 | 第32-34页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·质粒载体及菌种 | 第32页 |
| ·酶及化学试剂 | 第32页 |
| ·主要溶液成分 | 第32-33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-42页 |
| ·CTAB法提取植物DNA | 第34页 |
| ·菊花泛素延伸蛋白基因启动子片段的克隆 | 第34-36页 |
| ·DNA片段的回收和连接 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第37-38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| ·质粒的提取 | 第38-39页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第39-41页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-48页 |
| ·菊花泛素延伸蛋白基因启动子DgUEP的克隆 | 第42-43页 |
| ·转录起始位点的预测 | 第43页 |
| ·菊花泛素延伸蛋白基因启动子DgUEP的序列分析 | 第43-45页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·农杆菌LBA4404中植物表达载体的鉴定 | 第47页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 DgUEP启动子不同缺失片段植物表达载体的构建 | 第50-60页 |
| 1 材料 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50-54页 |
| ·DgUEP启动子3'端不同缺失表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·DgUEP启动子5'端不同缺失表达载体的构建 | 第52-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·DgUEP启动子3'端不同缺失载体的构建 | 第54-56页 |
| ·DgUEP启动子5'端不同缺失载体的构建 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 DgUEP启动子不同缺失片段在植物中的功能分析 | 第60-76页 |
| 1 材料与试剂 | 第60-62页 |
| ·植物材料 | 第60页 |
| ·药品试剂 | 第60-62页 |
| ·培养基 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| 2 实验方法 | 第62-66页 |
| ·DgUEP启动子缺失片段在菊花和烟草中的瞬时表达分析 | 第62-65页 |
| ·DgUEP启动子缺失片段在烟草中的稳定表达分析 | 第65-66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-73页 |
| ·农杆菌介导的GUS基因在烟草和菊花中的瞬时表达 | 第66-72页 |
| ·不同缺失片段驱动的GUS基因在烟草中的稳定表达 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| ·蛋白质含量的测定方法 | 第73页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达 | 第73-74页 |
| ·启动子的功能分析 | 第74-76页 |
| 小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
