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靶向蛋白激酶C抑制剂筛选模型的建立及化合物的筛选与评价

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
前言第11-14页
第一部分 分子水平PKC抑制剂筛选模型的建立第14-31页
   ·前言第14-15页
   ·实验材料第15-17页
     ·实验试剂与材料第15-16页
     ·常用缓冲液及其他溶液第16页
     ·待筛化合物和阳性对照化合物第16页
     ·实验仪器第16-17页
   ·实验方法第17-23页
     ·基于荧光偏振技术的PKCβⅡ抑制剂筛选模型的建立第17-21页
     ·荧光偏振PKCβⅡ抑制剂筛选体系验证第21-22页
     ·利用荧光偏振PKCβⅡ抑制剂筛选模型筛选PKCβⅡ抑制剂第22-23页
   ·实验结果第23-28页
     ·基于荧光偏振技术的PKCβⅡ抑制剂筛选模型的建立第23-26页
     ·用PKC抑制剂十字孢碱(staurosporine,SP)验证筛选体系第26-27页
     ·利用荧光偏振PKCβⅡ抑制剂筛选模型筛选PKCβⅡ抑制剂第27-28页
   ·讨论第28-30页
   ·小结第30-31页
第二部分 细胞水平PKC抑制剂筛选模型的建立及化合物的肿瘤细胞行为学影响第31-68页
   ·前言第31-32页
   ·实验材料第32-36页
     ·实验试剂与材料第32-33页
     ·常用缓冲液及其他溶液第33-35页
     ·实验仪器第35页
     ·实验菌种第35页
     ·逆转录病毒表达载体第35页
     ·细胞株与细胞培养第35-36页
   ·实验方法第36-51页
     ·PKCα、PKCβⅡ和PKCδ目的基因片段的获得第36-39页
     ·pBABE -puro逆转录病毒表达载体的构建第39-43页
     ·细胞水平PKC抑制剂筛选模型的建立、评价及应用第43-49页
     ·MDZ-03 对肿瘤细胞株A549 的细胞行为学影响第49-51页
   ·实验结果第51-64页
     ·含目的基因片段的质粒小量抽提以及测序鉴定结果第51-52页
     ·PCR扩增目的基因以及PCR产物纯化第52-53页
     ·pBABE -puro载体的抽提第53-54页
     ·pBABE -puro载体及PCR产物的双酶切以及胶回收第54-55页
     ·重组表达载体的鉴定第55-56页
     ·PKC高表达单克隆细胞株的鉴定第56-58页
     ·细胞水平PKC抑制剂筛选模型的评价及应用第58-60页
     ·MDZ-03 对肿瘤细胞株A549 的细胞行为学影响第60-64页
   ·讨论第64-67页
   ·小结第67-68页
结论第68-69页
参考文献第69-71页
综述第71-81页
致谢第81-82页
个人简历第82-83页
发表的学术论文第83页

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