摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
前言 | 第11-14页 |
第一部分 分子水平PKC抑制剂筛选模型的建立 | 第14-31页 |
·前言 | 第14-15页 |
·实验材料 | 第15-17页 |
·实验试剂与材料 | 第15-16页 |
·常用缓冲液及其他溶液 | 第16页 |
·待筛化合物和阳性对照化合物 | 第16页 |
·实验仪器 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-23页 |
·基于荧光偏振技术的PKCβⅡ抑制剂筛选模型的建立 | 第17-21页 |
·荧光偏振PKCβⅡ抑制剂筛选体系验证 | 第21-22页 |
·利用荧光偏振PKCβⅡ抑制剂筛选模型筛选PKCβⅡ抑制剂 | 第22-23页 |
·实验结果 | 第23-28页 |
·基于荧光偏振技术的PKCβⅡ抑制剂筛选模型的建立 | 第23-26页 |
·用PKC抑制剂十字孢碱(staurosporine,SP)验证筛选体系 | 第26-27页 |
·利用荧光偏振PKCβⅡ抑制剂筛选模型筛选PKCβⅡ抑制剂 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
·小结 | 第30-31页 |
第二部分 细胞水平PKC抑制剂筛选模型的建立及化合物的肿瘤细胞行为学影响 | 第31-68页 |
·前言 | 第31-32页 |
·实验材料 | 第32-36页 |
·实验试剂与材料 | 第32-33页 |
·常用缓冲液及其他溶液 | 第33-35页 |
·实验仪器 | 第35页 |
·实验菌种 | 第35页 |
·逆转录病毒表达载体 | 第35页 |
·细胞株与细胞培养 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-51页 |
·PKCα、PKCβⅡ和PKCδ目的基因片段的获得 | 第36-39页 |
·pBABE -puro逆转录病毒表达载体的构建 | 第39-43页 |
·细胞水平PKC抑制剂筛选模型的建立、评价及应用 | 第43-49页 |
·MDZ-03 对肿瘤细胞株A549 的细胞行为学影响 | 第49-51页 |
·实验结果 | 第51-64页 |
·含目的基因片段的质粒小量抽提以及测序鉴定结果 | 第51-52页 |
·PCR扩增目的基因以及PCR产物纯化 | 第52-53页 |
·pBABE -puro载体的抽提 | 第53-54页 |
·pBABE -puro载体及PCR产物的双酶切以及胶回收 | 第54-55页 |
·重组表达载体的鉴定 | 第55-56页 |
·PKC高表达单克隆细胞株的鉴定 | 第56-58页 |
·细胞水平PKC抑制剂筛选模型的评价及应用 | 第58-60页 |
·MDZ-03 对肿瘤细胞株A549 的细胞行为学影响 | 第60-64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
综述 | 第71-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82-83页 |
发表的学术论文 | 第83页 |