| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| ·研究目的和意义 | 第12-13页 |
| ·口蹄疫病毒的概述 | 第13-16页 |
| ·FMD 历史 | 第13-14页 |
| ·FMD 的流行现状及危害 | 第14-15页 |
| ·FMDV 的基因组结构 | 第15-16页 |
| ·口蹄疫病毒前导蛋白的研究进展 | 第16-21页 |
| ·Leader 蛋白（L~(pro)）的产生机制 | 第16页 |
| ·前导蛋白切断宿主蛋白质的合成 | 第16-17页 |
| ·前导蛋白是口蹄疫病毒毒力的重要决定因素 | 第17-18页 |
| ·前导蛋白是阻止宿主先天免疫反应的主要因素 | 第18-20页 |
| ·前导蛋白与宿主细胞凋亡的关系 | 第20-21页 |
| ·FMDV 在细胞凋亡中的研究进展 | 第21-30页 |
| ·凋亡概念的形成 | 第21页 |
| ·细胞凋亡的一般概念 | 第21-23页 |
| ·细胞凋亡与细胞程序性死亡（PCD） | 第21-22页 |
| ·细胞凋亡与坏死的区别 | 第22-23页 |
| ·细胞凋亡的两种主要途径 | 第23-25页 |
| ·死亡受体介导的细胞凋亡途径(Death receptor-mediated pathway) | 第23-24页 |
| ·线粒体凋亡途径（mitochondrial pathway） | 第24-25页 |
| ·FMDV 对宿主细胞凋亡的影响 | 第25-27页 |
| ·细胞凋亡的检测方法 | 第27-30页 |
| ·凋亡细胞形态学检测方法 | 第27-28页 |
| ·凋亡细胞生化特征检测方法 | 第28-29页 |
| ·凋亡细胞的流式细胞仪检测技术 | 第29-30页 |
| ·细胞凋亡的相关蛋白分析 | 第30页 |
| ·其它检测方法 | 第30页 |
| ·研究内容和方法 | 第30-31页 |
| 第二章 可调控表达口蹄疫病毒前导蛋白 L~(pro) 的 MDBK-L 细胞系鉴定 | 第31-41页 |
| ·前言 | 第31-32页 |
| ·材料与方法 | 第32-37页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-37页 |
| ·寡聚核苷酸引物的设计与合成 | 第33页 |
| ·MDBK-L 细胞系复苏与培养 | 第33页 |
| ·Lab 基因在 MDBK-L 细胞系中整合的稳定性鉴定 | 第33-35页 |
| ·RT-PCR 检测Lab 在MDBK 细胞中的稳定表达 | 第35-36页 |
| ·MDBK 细胞系 RNA 的提取 | 第35页 |
| ·Lab 基因的RT-PCR 的扩增 | 第35-36页 |
| ·Lab 基因表达产物的Western-blot 检测 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·Lab 基因的PCR 扩增 | 第37页 |
| ·Lab 基因的RT-PCR 扩增 | 第37-38页 |
| ·Lab 基因表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第38-39页 |
| ·Lab 基因表达产物的Western-blot 检测 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 口蹄疫病毒L~(pro) 致 MDBK 细胞死亡方式研究 | 第41-49页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·MDBK-L 细胞系复苏与培养 | 第43页 |
| ·前导蛋白诱导表达的显微镜观察 | 第43页 |
| ·Hoechst 33258 染色 | 第43页 |
| ·AO-EB 染色 | 第43-44页 |
| ·DNA Ladder 条带检测 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·L~(pro) 诱导 MDBK 细胞系死亡的形态学特征 | 第44-45页 |
| ·L~(pro) 诱导MDBK 细胞系死亡的Hoechst 33258 染色 | 第45-46页 |
| ·L~(pro) 诱导MDBK 细胞系死亡的AO-EB 染色 | 第46页 |
| ·L~(pro) 诱导MDBK 细胞系死亡的DNA Ladder 条带检测 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 口蹄疫病毒L~(pro)致MDBK 细胞凋亡的分子机制初步研究 | 第49-60页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·材料与方法 | 第50-55页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-55页 |
| ·引物的设计与合成 | 第51页 |
| ·MDBK-L 细胞系复苏与培养 | 第51-52页 |
| ·MTT 法测定细胞活性 | 第52页 |
| ·凋亡细胞的原位末端转移酶标记法（TUNEL 法） | 第52-53页 |
| ·流式细胞术（FCM）检测 | 第53页 |
| ·RT-PCR 检测诱导凋亡后细胞中Caspase-3 表达 | 第53-54页 |
| ·Western-blot 检测Caspase-3 的表达及活化 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·L~(pro) 诱导MDBK 凋亡的动力学分析 | 第55-57页 |
| ·TdT 介导的dUTP 缺口末端标记检测结果 | 第57页 |
| ·RT-PCR 检测Capsae-3 表达结果 | 第57-58页 |
| ·Western-blot 检测Caspase-3 的表达及活化 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第五章 研究结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 导师简介 | 第69-70页 |
