| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-32页 |
| 1 猪圆环病毒的基本生物学特性 | 第11-16页 |
| ·病毒的形态和理化性质 | 第11页 |
| ·病毒的分类地位 | 第11-12页 |
| ·PCV 的细胞培养特性 | 第12页 |
| ·猪圆环病毒（PCV）病的流行病学 | 第12-16页 |
| ·全球分布及发病情况 | 第12-14页 |
| ·PCV2 的致病性及流行特性 | 第14-15页 |
| ·病毒在体内的分布 | 第15-16页 |
| 2 病毒的分子生物学特性 | 第16-20页 |
| ·病毒的基因结构 | 第16页 |
| ·PCV 的复制及转录 | 第16-18页 |
| ·组成病毒的主要蛋白 | 第18-20页 |
| ·Rep 蛋白 | 第18-19页 |
| ·Cap 蛋白 | 第19-20页 |
| ·ORF3 蛋白 | 第20页 |
| 3 PCV2 的致病机理 | 第20-23页 |
| ·免疫系统的损伤 | 第20-23页 |
| ·PCV2 对免疫细胞的损伤 | 第21页 |
| ·PCV2 感染对细胞因子的调控 | 第21-22页 |
| ·其它因素对PCV2 感染的作用 | 第22-23页 |
| 4 PCV2 诊断方法研究进展 | 第23-29页 |
| ·病理变化及病理组织学检查 | 第23页 |
| ·病毒分离 | 第23页 |
| ·免疫学诊断方法 | 第23-25页 |
| ·酶联免疫吸附试验( ELISA ) | 第23-24页 |
| ·间接免疫荧光(IFA) | 第24页 |
| ·免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA) | 第24-25页 |
| ·免疫组织化学技术（Immunohistochemistry，IHC） | 第25页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第25-29页 |
| ·核酸原位杂交（In situ hybridization，ISH） | 第25-26页 |
| ·PCR 检测 | 第26-29页 |
| 5 PCV2 的疫苗研制及防制 | 第29-32页 |
| ·疫苗研制 | 第29-31页 |
| ·PCV2 灭活苗 | 第29-30页 |
| ·基因工程疫苗 | 第30-31页 |
| ·防制方法 | 第31-32页 |
| 引言 | 第32-33页 |
| 第二部分 实验研究 | 第33-57页 |
| 试验一 携带PCV2 Cap 蛋白特异性抗原表位重组腺病毒质粒的构建及鉴定 | 第33-48页 |
| 1 材料与方法 | 第33-43页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·质粒、菌株、细胞及病毒 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-43页 |
| ·试验具体路线 | 第34页 |
| ·PK-15 细胞中PCV1 的 PCR 检测 | 第34-35页 |
| ·PCV2 在PK-15 细胞中的增殖 | 第35-36页 |
| ·PCV2 DNA 的提取 | 第36页 |
| ·PCV2 ORF2 片段的扩增 | 第36-37页 |
| ·PCV2 ORF2 重组穿梭质粒的构建和鉴定 | 第37-40页 |
| ·骨架质粒pAdeasy-1 的转化BJ5183 | 第40-41页 |
| ·含骨架质粒的BJ5183/p 感受态的制备 | 第41页 |
| ·重组穿梭质粒rpShuttle-CMV-276 线性化、去磷酸化、转化及重组腺病毒质粒的鉴定 | 第41-43页 |
| 2 结果 | 第43-46页 |
| ·PK-15 细胞基因提取物的PCR 检测 | 第43页 |
| ·PCV2 ORF2 目的片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·重组穿梭质粒rpShuttle-CMV-276 的鉴定 | 第44页 |
| ·pAdeasy-1 质粒转化BJ5183 的鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组腺病毒质粒rPAd-276 的鉴定 | 第45-46页 |
| 3 小结与讨论 | 第46-48页 |
| ·引物设计 | 第46页 |
| ·重组腺病毒质粒的构建 | 第46-48页 |
| 试验二 携带PCV2 ORF2 基因重组腺病毒的包装及鉴定 | 第48-57页 |
| 1 材料与方法 | 第48-52页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·细胞与质粒 | 第48页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-52页 |
| ·重组腺病毒质粒rPAD-276 的提取、酶切及转染 | 第48-50页 |
| ·包装重组腺病毒的鉴定 | 第50-52页 |
| 2 结果 | 第52-55页 |
| ·转染结果鉴定 | 第52-53页 |
| ·重组腺病毒的PCR 鉴定 | 第53页 |
| ·重组腺病毒的IPMA 鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组腺病毒的IFA 鉴定 | 第54页 |
| ·重组腺病毒的间接ELISA 结果 | 第54页 |
| ·重组腺病毒的小鼠试验结果 | 第54-55页 |
| 3 小结与讨论 | 第55-57页 |
| ·重组腺病毒的转染 | 第55页 |
| ·重组腺病毒的包装 | 第55-57页 |
| 全文小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
