| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| ·开展应答逆境转录因子基因启动子分离及表达分子机制研究的意义 | 第10页 |
| ·WRKY 转录因子及启动子相关研究进展 | 第10-16页 |
| ·WRKY 转录因子的结构与功能 | 第10-12页 |
| ·WRKY 转录因子的结构和分类 | 第10-11页 |
| ·WRKY 转录因子在防御反应中的作用 | 第11-12页 |
| ·WRKY 转录因子在植物生长发育中的调节作用 | 第12页 |
| ·WRKY 转录因子在植物物质代谢中的调节作用 | 第12页 |
| ·植物基因启动子的结构与分类 | 第12-16页 |
| ·植物基因启动子的结构 | 第12-14页 |
| ·TATA 框 | 第13页 |
| ·CAAT-box | 第13-14页 |
| ·植物基因启动子分类 | 第14-16页 |
| ·组成型启动子 | 第14页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第14-15页 |
| ·诱导型启动子与顺式作用元件 | 第15-16页 |
| ·WRKY 蛋白的启动子结构与及其表达 | 第16页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-21页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-21页 |
| ·CTAB 法提取辣椒基因组DNA | 第17-18页 |
| ·LA-PCR 分离CaWRKY5 基因的启动子 | 第18页 |
| ·启动子缺失体的转化载体构建 | 第18-19页 |
| ·烟草无菌苗的准备 | 第19页 |
| ·农杆菌介导瞬间表达实验 | 第19-20页 |
| ·对烟草进行几种逆境处理 | 第20页 |
| ·GUS 化学组织分析 | 第20-21页 |
| 3 结果分析 | 第21-27页 |
| ·LA-PCR 获取CaWRKY5 基因的启动子序列 | 第21-22页 |
| ·LA-PCR 15t PCR | 第21页 |
| ·LA-PCR 211d PCR | 第21-22页 |
| ·TA 单克隆PCR 验证 | 第22页 |
| ·CaWRKY5 基因启动子的序列分析 | 第22-23页 |
| ·启动子缺失体的转化载体构建 | 第23-25页 |
| ·启动子各缺失体加内外侧引物PCR 反应的鉴定 | 第24页 |
| ·BP 反应重组质粒pDONR207-X 的PCR 鉴定 | 第24-25页 |
| ·Gateway LR 反应重组载体质粒pBGdGUS-X 的鉴定 | 第25页 |
| ·四个缺失体转化子的鉴定 | 第25页 |
| ·启动子各缺失体在烟草叶片瞬间表达系统中的表达分析 | 第25-27页 |
| ·全长启动子对几种诱导处理应答的分析 | 第25-26页 |
| ·启动子各缺失体几种逆境诱导下的GUS 组织化学分析 | 第26-27页 |
| 4 讨论与结论 | 第27-30页 |
| ·LA-PCR 和农杆菌渗入法的使用 | 第27-28页 |
| ·CaWRKY5 启动子的表达分析 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-34页 |
| 附录 | 第34-39页 |
| 附录1 缩略词及英汉对照 | 第34页 |
| 附录2 主要实验仪器和试剂盒 | 第34-35页 |
| 附录3 培养基的配方 | 第35-37页 |
| 附录4 本文中涉及的质粒 | 第37-38页 |
| 附录5 LA-PCR 原理图 | 第38页 |
| 附录6 DNA Marker 示意图 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39页 |
