中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词简表 | 第9-13页 |
第一章 前言 | 第13-20页 |
·研究基础 | 第13-18页 |
·NRDR与atRA的代谢调节 | 第13-14页 |
·DHRS4 基因簇结构及其转录调节 | 第14-15页 |
·选择性剪接 | 第15-17页 |
·半定量RT-PCR | 第17-18页 |
·研究意义 | 第18页 |
·研究目标和研究内容 | 第18-20页 |
·研究目标 | 第18-19页 |
·研究内容 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-31页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·细胞株来源 | 第20页 |
·细菌和载体 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-31页 |
·细胞培养 | 第22页 |
·细胞总 RNA 提取 | 第22-23页 |
·3’RACE 法 | 第23-26页 |
·胶回收试剂盒回收 PCR 产物 | 第26页 |
·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·PCR 产物的体外连接 | 第27-28页 |
·重组质粒的转化 | 第28-29页 |
·菌落 PCR 筛选阳性克隆并测序 | 第29页 |
·新亚型序列分析 | 第29页 |
·RT-PCR 半定量分析 | 第29-31页 |
第三章 结果和讨论 | 第31-46页 |
·细胞总RNA提取结果 | 第31-32页 |
·两种方法提取细胞总RNA | 第31-32页 |
·小结 | 第32页 |
·新亚型DHRS4L1A1 的鉴定 | 第32-36页 |
·HepG2 细胞mRNA 的RT-PCR | 第32-34页 |
·胶回收试剂盒回收目的条带 | 第34页 |
·重组质粒菌落PCR并测序 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
·新亚型全长cDNA的克隆 | 第36-37页 |
·3’末端的克隆 | 第36-37页 |
·新亚型全长cDNA的验证 | 第37页 |
·小结 | 第37页 |
·序列分析 | 第37-41页 |
·分析DHRS4L1A1 结构 | 第37-39页 |
·预测DHRS4L1A1 的ORF和氨基酸序列 | 第39页 |
·预测由DHRS4L1A1 编码的蛋白质的空间构型 | 第39-41页 |
·小结 | 第41页 |
·不同细胞株表达情况的半定量分析 | 第41-44页 |
·RT-PCR引物设计结果 | 第41-42页 |
·不同细胞株中DHRS4L1A1 表达结果 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
第四章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
硕士期间发表论文情况 | 第52-53页 |
个人简介 | 第53页 |