| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-29页 |
| 第一节 原子力显微镜简介 | 第10-16页 |
| ·原子力显微镜的构造及成像原理 | 第10-11页 |
| ·原子力显微镜的工作模式 | 第11-15页 |
| ·AFM成像环境、基底选择及样品准备 | 第15-16页 |
| 第二节 原子力显微镜在细胞结构与功能中的应用 | 第16-22页 |
| ·分析单细胞的意义与目的 | 第16-17页 |
| ·原子力显微镜对细胞结构的可视化研究 | 第17-18页 |
| ·细胞膜表面力学、弹性、粘度等信息的获取 | 第18-19页 |
| ·AFM弹性检测在细胞生物学中的运用 | 第19-22页 |
| 第三节 细胞膜毒性研究的意义 | 第22页 |
| 第四节 展望 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| 第二章 青蒿琥酯的细胞膜毒性研究 | 第29-68页 |
| 1 引言 | 第29-30页 |
| 2 实验材料与方法 | 第30-36页 |
| ·试剂、材料 | 第30-31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·Jurkat细胞培养及分离淋巴细胞 | 第31-32页 |
| ·注射用青蒿琥酯工作液的准备 | 第32页 |
| ·细胞存活率测定 | 第32页 |
| ·原子力显微镜样品制备 | 第32页 |
| ·原子力显微镜扫描 | 第32-33页 |
| ·整合素(integrinβ1)含量的流式检测 | 第33页 |
| ·细胞骨架蛋白F-actin和Tubulin-β的流式检测 | 第33页 |
| ·细胞膜Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的测定 | 第33-35页 |
| ·细胞膜电位测定 | 第35页 |
| ·Western blot法检测细胞内CyclinD1和Caspase3的蛋白表达水平 | 第35页 |
| ·酶标仪检测细胞中LDH活性 | 第35-36页 |
| 4 结果与讨论 | 第36-58页 |
| ·青蒿琥酯对Jurkat细胞生长的抑制作用 | 第36页 |
| ·倒置荧光显微镜观察Jurkat细胞 | 第36-37页 |
| ·Jurkat细胞形态结构的AFM分析 | 第37-46页 |
| ·Jurkat细胞的弹性分析 | 第46-47页 |
| ·青蒿琥酯对Jurkat细胞膜表面整合素的影响 | 第47-49页 |
| ·Western blot检测Jurkat细胞骨架F-actin和Tubulin-β蛋白 | 第49-51页 |
| ·青蒿琥酯对Jurkat细胞膜表面的ATP酶的影响 | 第51-53页 |
| ·流式细胞仪检测不同浓度的青蒿琥酯对Jurkat细胞膜电位的影响 | 第53-54页 |
| ·青蒿琥酯作用Jurkat细胞后的CyclinD1和Caspase-3蛋白的表达情况 | 第54-58页 |
| 本章总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 第三章 原子力显微镜探测健康人淋巴细胞和JURKAT细胞 | 第68-89页 |
| 1 引言 | 第68-69页 |
| 2 实验材料与方法 | 第69-71页 |
| ·实验试剂 | 第69页 |
| ·实验使用仪器 | 第69页 |
| ·细胞的培养 | 第69页 |
| ·AFM样品制备 | 第69-70页 |
| ·AFM成像及力谱测量 | 第70页 |
| ·共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin结构排布 | 第70页 |
| ·流式细胞仪检测细胞骨架蛋白F-actin和Tubulin-β含量 | 第70-71页 |
| 3 结果与讨论 | 第71-84页 |
| ·淋巴细胞及Jurkat细胞形态结构的AFM观察 | 第71-74页 |
| ·原子力显微镜探测健康人淋巴细胞和Jurkat细胞的弹性 | 第74-75页 |
| ·共聚焦显微镜结合鬼笔环肽-FITC观察健康人淋巴细胞和Jurkat细胞的F-actin骨架蛋白 | 第75-76页 |
| ·流式细胞仪结合鬼笔环肽-FITC及Tubulin-β-FITC荧光染料检测细胞骨架蛋白含量变化 | 第76-77页 |
| ·原子力显微镜观察细胞松弛素B作用淋巴细胞和Jurkat细胞后的形貌变化 | 第77-82页 |
| ·原子力显微镜观察探测细胞松弛素B作用淋巴细胞和Jurkat细胞后的弹性变化 | 第82-84页 |
| 本章总结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-89页 |
| 附录1 英文缩略语表 | 第89-90页 |
| 附录2 攻读硕士学位期间参加科研工作基本情况 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
