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木豆叶中具有雌激素样活性的黄酮类成分提取分离及其抗肿瘤活性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-17页
1 绪论第17-31页
   ·木豆概述第17-18页
     ·木豆的形态特征第17页
     ·木豆的生物学特性第17页
     ·木豆的分布第17-18页
     ·木豆的育种与栽培技术第18页
   ·木豆的化学成分第18-19页
   ·木豆的药用第19-20页
   ·负压空化提取技术第20-22页
   ·植物雌激素第22-26页
     ·植物雌激素的化学分类及分布第22-23页
     ·植物雌激素对癌症的药理作用第23-25页
     ·植物雌激素抗癌的作用机理第25-26页
   ·雌激素受体α和β(ERα和ERβ)第26-29页
     ·ERα和ERβ的发现第26-27页
     ·ERα和ERβ的分布和效应第27页
     ·ERα和ERβ的组成与功能第27-29页
     ·植物雌激素与ERα和ERβ第29页
   ·研究目的、意义和主要研究内容第29-31页
2 木豆叶中黄酮类成分分析方法的建立第31-42页
   ·实验部分第32-34页
     ·仪器与试剂第32页
     ·标准溶液的配制第32-33页
     ·样品溶液的制备第33页
     ·液相色谱条件第33页
     ·质谱条件第33页
     ·方法学研究第33-34页
   ·结果与讨论第34-41页
     ·色谱条件的优化第34页
     ·黄酮类成分的质谱检测第34-38页
     ·方法学验证第38-40页
     ·木豆叶样品的测定第40-41页
   ·本章小结第41-42页
3 木豆幼苗生长及采收后储藏过程中黄酮类成分含量变化第42-49页
   ·实验部分第42-43页
     ·仪器与试剂第42-43页
     ·木豆的播种及取样第43页
     ·储藏条件第43页
     ·样品制备第43页
     ·黄酮类成分的定量分析第43页
     ·统计分析第43页
   ·结果与讨论第43-48页
     ·木豆幼苗生长过程中黄酮类成分含量变化第43-46页
     ·木豆叶采收后储藏过程中黄酮类成分含量变化第46-48页
   ·本章小结第48-49页
4 负压空化高效提取木豆叶中黄酮类成分研究第49-62页
   ·实验部分第50-52页
     ·仪器与试剂第50页
     ·提取装置第50-51页
     ·扫描电镜条件第51页
     ·提取过程第51-52页
     ·LC-MS/MS检测第52页
   ·结果与讨论第52-61页
     ·负压空化提取及其机制第52-54页
     ·负压空化提取条件的优化第54-58页
     ·不同提取方法的比较第58-60页
     ·扫描电镜观察第60-61页
   ·本章小结第61-62页
5 pER8-GFP转基因拟南芥筛选木豆叶提取物中雌激素样活性组分研究第62-66页
   ·实验部分第62-64页
     ·仪器与试剂第62页
     ·木豆叶提取物及不同组分样品的制备第62-63页
     ·对照雌二醇样品溶液的配制第63页
     ·MS培养基的配制第63页
     ·播种拟南芥的方法第63页
     ·雌激素样活性组分筛选实验第63页
     ·激光共聚焦显微镜观察第63-64页
   ·结果与讨论第64-65页
     ·对照雌二醇诱导GFP蛋白表达情况第64页
     ·木豆叶提取物及不同组分的雌激素样活性第64-65页
   ·本章小结第65-66页
6 中压柱层析结合重结晶技术分离纯化木豆叶提取物乙酸乙酯层中黄酮类成分研究第66-73页
   ·实验部分第66-69页
     ·仪器与试剂第66-67页
     ·芹菜素、木犀草素、异鼠李素、cajanol的HPLC检测条件第67页
     ·牡荆苷、异牡荆苷、荭草苷、染料木苷的HPLC检测条件第67页
     ·乙酸乙酯层样品溶液的制备第67-68页
     ·芹菜素、木犀草素、异鼠李素、cajanol的大孔树脂分离富集第68页
     ·牡荆苷、异牡荆苷、荭草苷、染料木苷的大孔树脂分离富集第68页
     ·芹菜素、木犀草素、异鼠李素、cajanol的反相ODS中压柱层析纯化第68页
     ·牡荆苷、异牡荆苷、荭草苷、染料木苷的反相ODS中压柱层析纯化第68-69页
   ·结果与讨论第69-71页
     ·木犀草素、芹菜素、异鼠李素和cajanol的纯化结果第69-70页
     ·牡荆苷、异牡荆苷、荭草苷和染料木苷的纯化结果第70-71页
   ·本章小结第71-73页
7 pER8-GFP转基因拟南芥高效快速筛选雌激素样活性成分研究第73-77页
   ·实验部分第73-74页
     ·仪器与试剂第73-74页
     ·黄酮类成分样品溶液的配制第74页
     ·雌激素样活性成分筛选实验第74页
   ·结果与讨论第74-76页
     ·黄酮类成分的雌激素样活性第74-76页
   ·本章小结第76-77页
8 Cajanol抗肿瘤活性初步研究第77-89页
   ·实验部分第77-84页
     ·仪器与试剂第77-79页
     ·主要溶液配制第79-81页
     ·培养用品的准备第81页
     ·肿瘤细胞的复苏第81-82页
     ·肿瘤细胞的培养与传代第82页
     ·MTT法测定cajanol对肿瘤细胞的抑制作用第82页
     ·倒置显微镜观察细胞形态第82页
     ·流式细胞仪检测细胞周期的变化第82页
     ·Western blotting程序第82-84页
   ·结果与讨论第84-88页
     ·Cajanol对PC-3前列腺癌细胞体外增殖的抑制作用第84-85页
     ·显微镜观察cajanol对PC-3前列腺癌细胞的抑制作用第85-86页
     ·Cajanol对PC-3前列腺癌细胞的周期阻滞作用第86-87页
     ·Cajanol对雌激素受体ERα和ERβ表达的抑制作用第87-88页
   ·本章小结第88-89页
结论第89-93页
参考文献第93-103页
攻读学位期间发表的学术论文第103-105页
致谢第105-106页

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