中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
中英文缩略词简表 | 第9-10页 |
一、前言 | 第10-14页 |
二、实验材料 | 第14-18页 |
·主要实验仪器 | 第14-15页 |
·主要实验试剂 | 第15-18页 |
三、实验方法 | 第18-42页 |
·细菌培养 | 第18页 |
·重组质粒的提取及鉴定 | 第18-20页 |
·细胞培养 | 第20-21页 |
·质粒转染及稳定细胞株的筛选 | 第21-22页 |
·基因组的提取 | 第22-23页 |
·RNA的提取 | 第23-24页 |
·蛋白的提取 | 第24-26页 |
·转染后阳性克隆的鉴定 | 第26-33页 |
·MTT检测细胞增殖 | 第33页 |
·软琼脂克隆形成实验 | 第33-34页 |
·细胞周期检测 | 第34页 |
·Real-time PCR检测E2F1,cyclin D1,cyclin G1,c-myc的mRNA表达 | 第34-36页 |
·Western blot检测E2F1,cyclin D1,cyclin G1,c-myc蛋白质表达 | 第36页 |
·免疫荧光检测NF-kb的表达 | 第36-37页 |
·microRNA芯片检测 | 第37-42页 |
四、统计学处理 | 第42-43页 |
五、实验结果 | 第43-69页 |
·重组质粒的鉴定 | 第43-50页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第50-54页 |
·MTT检测结果 | 第54-55页 |
·软琼脂克隆形成实验 | 第55-58页 |
·细胞周期检测结果 | 第58-59页 |
·Real-time PCR检测各组细胞E2F1,cyclin D1,cyclin G1,c-myc的mRNA表达水平 | 第59-64页 |
·Western blot检测各组细胞E2F1,cyclin D1,cyclin G1,c-myc蛋白质表达水平 | 第64-65页 |
·免疫荧光检测各组细胞NF-kb的表达 | 第65-66页 |
·microRNA芯片检测结果 | 第66-69页 |
六、讨论 | 第69-82页 |
七、全文总结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-99页 |
综述 | 第99-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第127页 |