CD11a(ITGAL)、CD70(TNFSF7)基因甲基化定量芯片的构建
中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
缩略词 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-28页 |
·研究对象 | 第14页 |
·仪器设备与试剂 | 第14-15页 |
·主要仪器设备 | 第14页 |
·主要试剂及耗材 | 第14-15页 |
·DNA芯片的制备 | 第15-17页 |
·芯片杂交原理 | 第15-16页 |
·探针的设计 | 第16页 |
·探针的点样 | 第16页 |
·探针的固定 | 第16-17页 |
·制备甲基化阴性和甲基化阳性标准品 | 第17-24页 |
·亚硫酸氢钠测序 | 第17-24页 |
·DNA的亚硫酸氢钠处理 | 第17-18页 |
·巢式PCR | 第18-20页 |
·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第20-21页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第21页 |
·大肠杆菌(DH5α)感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
·连接 | 第22页 |
·转化 | 第22-23页 |
·重组质粒的鉴定及提取 | 第23页 |
·质粒的鉴定与测序 | 第23-24页 |
·挑选甲基化阴性和甲基化阳性质控品 | 第24页 |
·芯片杂交反应 | 第24-27页 |
·外周血单核细胞分离 | 第24-25页 |
·磁珠分离CD4+T细胞 | 第25页 |
·DNA抽提 | 第25-26页 |
·对抽提出的DNA进行亚硫酸氢钠转化处理 | 第26页 |
·巢式PCR | 第26页 |
·芯片杂交 | 第26-27页 |
·扫描检测 | 第27页 |
·计算样本甲基化程度 | 第27页 |
·标准曲线的建立 | 第27页 |
·芯片方法的验证 | 第27页 |
·芯片方法检测临床样本 | 第27页 |
·统计学方法 | 第27-28页 |
第三章 结果 | 第28-34页 |
·标准曲线的建立 | 第28-30页 |
·芯片验证结果 | 第30-31页 |
·芯片方法在临床样本中的应用 | 第31-34页 |
第四章 讨论 | 第34-36页 |
第五章 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
综述 | 第40-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第53页 |