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四环素诱导表达NF-kB信号通路抑制因子p65RHD在猪血管内皮细胞中的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-8页
1 前言第8-14页
   ·异种移植研究的背景第8-10页
     ·异种移植的技术问题第8-9页
     ·异种移植所面临困难的解决途径第9-10页
   ·NF-κB信号通路第10页
   ·LPS引起血管内皮细胞的激活第10页
   ·抑制NF-κB信号通路的方法第10-11页
   ·检测NF-κB信号通路激活的方法第11-12页
   ·四环素诱导表达系统第12页
   ·增强型绿色荧光蛋白第12-14页
2 材料与方法第14-36页
   ·试验材料第14-16页
     ·主要试剂第14页
     ·主要仪器第14-15页
     ·主要试剂的配制第15页
     ·主要分析软件第15-16页
   ·实验方法第16-36页
     ·PIEC p65基因的克隆第16-20页
     ·p65RHD的克隆第20-22页
     ·ICAM-2启动子及内含子的克隆第22-23页
     ·TRE元件的克隆第23-25页
     ·载体信息介绍第25-28页
     ·p65RHD片段与pIRES2-EGFP载体的连接第28-29页
     ·TRE片段与pIRES2-p65RHD-EGFP载体的连接第29页
     ·转染用无内毒素质粒的提取第29-30页
     ·细胞实验第30-33页
     ·四环素诱导表达系统的试验第33-36页
3 结果与分析第36-48页
   ·载体构建第36-44页
     ·PIEC p65基因的克隆第36-44页
   ·细胞实验第44-48页
     ·猪动脉血管内皮细胞(PIEC)(PIEC)第44页
     ·PCRIE转染观察第44-45页
     ·LPS刺激猪动脉血管内皮细胞(PIEC)NF-κB信号通路激活的研究第45页
     ·p65RHD的过表达抑制NF-κB信号通路的实验第45-46页
     ·四环素诱导表达实验第46-48页
4 讨论第48-50页
5 结论第50-51页
参考文献第51-56页
致谢第56页

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