| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 类风湿性关节炎 | 第13-15页 |
| 1.2 类风湿性关节炎与间质性肺病 | 第15-16页 |
| 1.3 趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12 | 第16-18页 |
| 1.4 Cre/loxp重组系统的原理及其应用 | 第18-20页 |
| 第一章 建立CXCR4~(flox/flox)/Mx1-cre基因型小鼠 | 第20-33页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第20-21页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 1.2.1 小鼠繁殖体系建立 | 第21-23页 |
| 1.2.2 小鼠组织DNA提取 | 第23-24页 |
| 1.2.3 小鼠基因型鉴定 | 第24-25页 |
| 1.2.4 目的片段胶回收 | 第25-26页 |
| 1.2.5 连接与转化 | 第26页 |
| 1.2.6 菌落PCR鉴定 | 第26页 |
| 1.3 实验结果 | 第26-32页 |
| 1.3.1 CXCR4~(flox/flox)小鼠的基因分型 | 第26-28页 |
| 1.3.2 Mx1-cre转基因小鼠的基因分型 | 第28-29页 |
| 1.3.3 CXCR4~(flox/flox)/Mx1-cre小鼠的基因分型 | 第29-30页 |
| 1.3.4 小鼠loxp位点基因测序 | 第30-31页 |
| 1.3.5 小鼠Cre基因测序 | 第31页 |
| 1.3.6 不同基因型小鼠数量的统计 | 第31-32页 |
| 1.4 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 建立淋巴细胞CXCR4条件性敲除小鼠的遗传模型 | 第33-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 实验小鼠分组 | 第33页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 Cre重组酶的体内诱导表达 | 第34页 |
| 2.2.2 小鼠淋巴细胞基因组DNA提取 | 第34-35页 |
| 2.2.3 PCR检测小鼠淋巴细胞基因组CXCR4的表达 | 第35-36页 |
| 2.2.4 Realtime PCR检测小鼠淋巴细胞CXCR4的表达 | 第36-38页 |
| 2.2.5 流式细胞术检测小鼠淋巴细胞CXCR4的表达 | 第38页 |
| 2.2.6 小鼠淋巴细胞体外迁移实验 | 第38-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-45页 |
| 2.3.1 小鼠外周血淋巴细胞CXCR4基因组水平表达 | 第40-41页 |
| 2.3.2 注射PI:PC后淋巴细胞CXCR4测序结果分析 | 第41-42页 |
| 2.3.3 小鼠外周血淋巴细胞CXCR4 mRNA表达水平变化 | 第42-43页 |
| 2.3.4 小鼠外周血淋巴细胞表面CXCR4表达水平变化 | 第43-44页 |
| 2.3.5 小鼠趋化因子受体CXCR4的功能变化 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 CXCR4在小鼠RA相关肺疾病的功能研究 | 第46-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第46页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第46页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 小鼠CIA造模方法 | 第46-47页 |
| 3.2.2 关节炎指数评分 | 第47页 |
| 3.2.3 石蜡切片 | 第47页 |
| 3.2.4 组织化学染色 | 第47-48页 |
| 3.2.5 Realtime PCR检测CIA小鼠肺组织炎症因子表达 | 第48页 |
| 3.2.6 流式细胞术检测CIA小鼠CXCR4表达淋巴细胞的阳性细胞比例 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-58页 |
| 3.3.1 CIA小鼠临床症状表现 | 第49-50页 |
| 3.3.2 CIA小鼠关节指数分析 | 第50页 |
| 3.3.3 CIA小鼠关节X线显影和组织化学染色 | 第50-52页 |
| 3.3.4 CIA小鼠肺部存在炎症 | 第52-53页 |
| 3.3.5 CXCR4敲除小鼠关节炎变化情况 | 第53-54页 |
| 3.3.6 CXCR4敲除小鼠肺炎变化情况 | 第54-55页 |
| 3.3.7 小鼠外周血淋巴细胞表达变化情况 | 第55-58页 |
| 3.4 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第59-63页 |
| 4.1 讨论 | 第59-61页 |
| 4.1.1 小鼠淋巴细胞CXCR4条件性敲除模型 | 第59-60页 |
| 4.1.2 淋巴细胞CXCR4敲除对RA的影响 | 第60页 |
| 4.1.3 淋巴细胞CXCR4敲除对RA-ILD的影响 | 第60-61页 |
| 4.2 存在的问题及展望 | 第61-62页 |
| 4.3 总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录1 常见溶液配制方法 | 第70-72页 |
| 附录2 DNA测序报告 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
