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骨髓间充质干细胞源性的外泌体对早产儿脑损伤模型的免疫调节研究

中文摘要第5-8页
Abstract第8-11页
主要缩略词(Abbreviation)第12-15页
前言第15-18页
综述 骨髓间充质干细胞在脑损伤中的研究进展第18-23页
第一章 材料与方法第23-45页
    1.1 实验动物及分组第23页
        1.1.1 实验动物第23页
        1.1.2 实验分组第23页
    1.2 主要实验仪器第23-25页
    1.3 主要实验试剂第25-26页
    1.4 主要实验配剂第26-27页
    1.5 实验方法第27-45页
        1.5.1 BMSCs原代分离培养及纯化:全骨髓贴壁法第27-28页
        1.5.2 收集培养BMSCs上清液第28页
        1.5.3 富集BMSCs-exo:超高速离心法第28页
        1.5.4 免疫印迹法(Western-blot)鉴定外泌体表面特异分子第28-33页
            1.5.4.1 免疫印迹(Western blot)法检测外泌体表面特异标志CD63第28-33页
        1.5.5 BMSCs细胞的相关实验操作第33-34页
            1.5.5.1 BMSCs细胞的传代第33页
            1.5.5.2 骨髓间充质干细胞(BMSCs)的冻存第33-34页
            1.5.5.3 骨髓间充质干细胞(BMSCs)的复苏第34页
            1.5.5.4 骨髓间充质干细胞(BMSCs)的细胞计数第34页
        1.5.6 动物模型制备、实验分组及取材模型制作第34-35页
            1.5.6.1 动物模型制备第34-35页
            1.5.6.2 实验分组第35页
            1.5.6.3 脑组织实验取材第35页
        1.5.7 HE染色观察各实验组脑组织病理改变第35-36页
        1.5.8 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎症因子第36-39页
            1.5.8.1 检测IL-6 分泌趋势及浓度第36-37页
            1.5.8.2 检测TGF-β分泌趋势及浓度第37-39页
        1.5.9 免疫组化检测IL-6、TGF-β在脑组织中的分泌部位及浓度第39-40页
        1.5.10 提取脑组织中的总RNA第40页
        1.5.11 RT-PCR技术检测脑组织中的IL-6 及TGF-β的mRNA表达量cDNA的制备第40-41页
        1.5.12 Real Time-PCR预实验第41-44页
        1.5.13 实验技术路线第44页
        1.5.14 统计学分析第44-45页
第二章 实验结果第45-61页
    2.1 早产儿脑损伤模型制作及模后乳鼠的外观、行为改变及标本制备第45-47页
        2.1.1 制作WMD模型第45页
        2.1.2 乳鼠的外观及行为改变第45页
        2.1.3 侧脑室立体定向注射第45-46页
        2.1.4 分离实验时间点乳鼠脑第46-47页
    2.2 实验动物在不同时间点的体质量评价第47-48页
    2.3 BMSCs培养结果第48页
        2.3.1 BMSCs细胞形态观察第48页
    2.4 EXO鉴定结果第48-50页
        2.4.1 透射电镜下观察第48-49页
        2.4.2 WB鉴定EXO特异性表达分子第49-50页
    2.5 脑组织病理学结果第50页
    2.6 酶联免疫吸附实验结果第50-57页
        2.6.1 预实验第50-53页
            2.6.1.1 脑匀浆上清液中IL-6 蛋白分泌情况第51页
            2.6.1.2 脑匀浆上清液中TGF-β蛋白分泌情况第51-52页
            2.6.1.3 ELISA预实验结果第52-53页
        2.6.2 正式实验第53-57页
            2.6.2.1 脑组织中IL-6 分泌表达量第53-54页
            2.6.2.2 ELISA正式实验IL-6 结果第54-55页
            2.6.2.3 脑组织中TGF-β表达量第55-56页
            2.6.2.4 ELISA正式实验TGF-β结果第56-57页
    2.7 免疫组化结果第57-61页
        2.7.1 左侧脑组织免疫组化中IL-6 阳性细胞表达第57-59页
        2.7.2 左侧脑组织免疫组化中TGF-β阳性细胞表达第59-60页
        2.7.3 免疫组化结果第60-61页
第三章 讨论第61-66页
    3.1 骨髓间充质源性外泌体(BMSCs-exo)的富集与用途第61页
    3.2 外泌体提取与鉴定的不同方法第61-62页
        3.2.1 差速离心法第61页
        3.2.2 免疫亲和捕获法第61-62页
        3.2.3 外泌体沉淀法第62页
    3.3 早产儿WMD模型脑内炎症环境第62-63页
    3.4 外泌体移植对早产儿WMD模型脑内炎症环境的影响第63-64页
    3.5 骨髓间充质干细胞上清液移植对早产儿WMD模型脑内炎症环境的影响第64页
    3.6 早产儿WMD模型脑内炎症环境的TGF-β及IL-6 研究意义第64-66页
第四章 结论第66-67页
第五章 问题与展望第67-68页
第六章 参考文献第68-75页
    6.1 前言参考文献第68-70页
    6.2 综述参考文献第70-73页
    6.3 讨论参考文献第73-75页
致谢第75-77页
作者简介第77-78页
    研究生期间发表的学术成果第77-78页

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