中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
主要缩略词(Abbreviation) | 第12-15页 |
前言 | 第15-18页 |
综述 骨髓间充质干细胞在脑损伤中的研究进展 | 第18-23页 |
第一章 材料与方法 | 第23-45页 |
1.1 实验动物及分组 | 第23页 |
1.1.1 实验动物 | 第23页 |
1.1.2 实验分组 | 第23页 |
1.2 主要实验仪器 | 第23-25页 |
1.3 主要实验试剂 | 第25-26页 |
1.4 主要实验配剂 | 第26-27页 |
1.5 实验方法 | 第27-45页 |
1.5.1 BMSCs原代分离培养及纯化:全骨髓贴壁法 | 第27-28页 |
1.5.2 收集培养BMSCs上清液 | 第28页 |
1.5.3 富集BMSCs-exo:超高速离心法 | 第28页 |
1.5.4 免疫印迹法(Western-blot)鉴定外泌体表面特异分子 | 第28-33页 |
1.5.4.1 免疫印迹(Western blot)法检测外泌体表面特异标志CD63 | 第28-33页 |
1.5.5 BMSCs细胞的相关实验操作 | 第33-34页 |
1.5.5.1 BMSCs细胞的传代 | 第33页 |
1.5.5.2 骨髓间充质干细胞(BMSCs)的冻存 | 第33-34页 |
1.5.5.3 骨髓间充质干细胞(BMSCs)的复苏 | 第34页 |
1.5.5.4 骨髓间充质干细胞(BMSCs)的细胞计数 | 第34页 |
1.5.6 动物模型制备、实验分组及取材模型制作 | 第34-35页 |
1.5.6.1 动物模型制备 | 第34-35页 |
1.5.6.2 实验分组 | 第35页 |
1.5.6.3 脑组织实验取材 | 第35页 |
1.5.7 HE染色观察各实验组脑组织病理改变 | 第35-36页 |
1.5.8 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎症因子 | 第36-39页 |
1.5.8.1 检测IL-6 分泌趋势及浓度 | 第36-37页 |
1.5.8.2 检测TGF-β分泌趋势及浓度 | 第37-39页 |
1.5.9 免疫组化检测IL-6、TGF-β在脑组织中的分泌部位及浓度 | 第39-40页 |
1.5.10 提取脑组织中的总RNA | 第40页 |
1.5.11 RT-PCR技术检测脑组织中的IL-6 及TGF-β的mRNA表达量cDNA的制备 | 第40-41页 |
1.5.12 Real Time-PCR预实验 | 第41-44页 |
1.5.13 实验技术路线 | 第44页 |
1.5.14 统计学分析 | 第44-45页 |
第二章 实验结果 | 第45-61页 |
2.1 早产儿脑损伤模型制作及模后乳鼠的外观、行为改变及标本制备 | 第45-47页 |
2.1.1 制作WMD模型 | 第45页 |
2.1.2 乳鼠的外观及行为改变 | 第45页 |
2.1.3 侧脑室立体定向注射 | 第45-46页 |
2.1.4 分离实验时间点乳鼠脑 | 第46-47页 |
2.2 实验动物在不同时间点的体质量评价 | 第47-48页 |
2.3 BMSCs培养结果 | 第48页 |
2.3.1 BMSCs细胞形态观察 | 第48页 |
2.4 EXO鉴定结果 | 第48-50页 |
2.4.1 透射电镜下观察 | 第48-49页 |
2.4.2 WB鉴定EXO特异性表达分子 | 第49-50页 |
2.5 脑组织病理学结果 | 第50页 |
2.6 酶联免疫吸附实验结果 | 第50-57页 |
2.6.1 预实验 | 第50-53页 |
2.6.1.1 脑匀浆上清液中IL-6 蛋白分泌情况 | 第51页 |
2.6.1.2 脑匀浆上清液中TGF-β蛋白分泌情况 | 第51-52页 |
2.6.1.3 ELISA预实验结果 | 第52-53页 |
2.6.2 正式实验 | 第53-57页 |
2.6.2.1 脑组织中IL-6 分泌表达量 | 第53-54页 |
2.6.2.2 ELISA正式实验IL-6 结果 | 第54-55页 |
2.6.2.3 脑组织中TGF-β表达量 | 第55-56页 |
2.6.2.4 ELISA正式实验TGF-β结果 | 第56-57页 |
2.7 免疫组化结果 | 第57-61页 |
2.7.1 左侧脑组织免疫组化中IL-6 阳性细胞表达 | 第57-59页 |
2.7.2 左侧脑组织免疫组化中TGF-β阳性细胞表达 | 第59-60页 |
2.7.3 免疫组化结果 | 第60-61页 |
第三章 讨论 | 第61-66页 |
3.1 骨髓间充质源性外泌体(BMSCs-exo)的富集与用途 | 第61页 |
3.2 外泌体提取与鉴定的不同方法 | 第61-62页 |
3.2.1 差速离心法 | 第61页 |
3.2.2 免疫亲和捕获法 | 第61-62页 |
3.2.3 外泌体沉淀法 | 第62页 |
3.3 早产儿WMD模型脑内炎症环境 | 第62-63页 |
3.4 外泌体移植对早产儿WMD模型脑内炎症环境的影响 | 第63-64页 |
3.5 骨髓间充质干细胞上清液移植对早产儿WMD模型脑内炎症环境的影响 | 第64页 |
3.6 早产儿WMD模型脑内炎症环境的TGF-β及IL-6 研究意义 | 第64-66页 |
第四章 结论 | 第66-67页 |
第五章 问题与展望 | 第67-68页 |
第六章 参考文献 | 第68-75页 |
6.1 前言参考文献 | 第68-70页 |
6.2 综述参考文献 | 第70-73页 |
6.3 讨论参考文献 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
作者简介 | 第77-78页 |
研究生期间发表的学术成果 | 第77-78页 |