中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
前言 | 第8-11页 |
实验材料和方法 | 第11-27页 |
1.实验动物 | 第11页 |
2.实验仪器 | 第11-12页 |
3.实验试剂 | 第12-13页 |
4.实验方法 | 第13-27页 |
4.1 溶液配制 | 第13-15页 |
4.2 细胞培养 | 第15-16页 |
4.3 小鼠基因型的鉴定 | 第16页 |
4.4 NO检测 | 第16页 |
4.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第16-19页 |
4.6 细胞转染 | 第19页 |
4.7 荧光素酶报告基因的检测 | 第19-20页 |
4.8 MTT检测 | 第20页 |
4.9 WesternBlotting免疫印迹 | 第20-21页 |
4.10 胞内ROS检测 | 第21-22页 |
4.11 黑质部位立体定位注射 | 第22页 |
4.12 小鼠MPTP模型的建立 | 第22页 |
4.13 ELISA | 第22-23页 |
4.14 线粒体ROS测定 | 第23页 |
4.15 行为学实验 | 第23页 |
4.16 免疫组织化学 | 第23-24页 |
4.17 ADP/ATP比值测定 | 第24页 |
4.18 NAD+/NADH比值测定 | 第24-25页 |
4.19 NADP+/NADPH比值测定 | 第25页 |
4.20 乳酸释放量的测定 | 第25页 |
4.21 葡萄糖摄取量的测定 | 第25页 |
4.22 线粒体膜电位的测定 | 第25-26页 |
4.23 ECAR和OCR的测定 | 第26页 |
4.24 数据处理和统计学方法 | 第26-27页 |
实验结果 | 第27-52页 |
1.CLK1缺失增加小胶质细胞对LPS的敏感性 | 第27-31页 |
2.过表达CLK1可抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应 | 第31-32页 |
3.CLK1缺失小胶质细胞ROS水平显著升高 | 第32-34页 |
4.CLK1缺失小胶质细胞有氧糖酵解增加 | 第34-36页 |
5.抑制有氧糖酵解改善CLK1缺失小胶质细胞炎症反应的增强 | 第36-39页 |
6.HIF-1Α表达增加介导CLK1缺失小胶质细胞糖酵解增加和炎症应答的增强 | 第39-42页 |
7.AMPK/MTOR信号通路和ROS信号介导CLK1缺失引起的HIF-1Α表达增加 | 第42-45页 |
8.CLK1~(+/-)小鼠对MPTP诱导PD模型更敏感,小胶质细胞激活更明显 | 第45-48页 |
9.CLK1缺失增加小胶质细胞过度激活引起的DA神经元死亡 | 第48-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
缩略词 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |