| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第16-34页 |
| 1.1 结核病的现状 | 第16-17页 |
| 1.2 结核分枝杆菌病原生物学 | 第17-19页 |
| 1.3 结核分枝杆菌的感染及宿主的防御机制 | 第19-24页 |
| 1.4 结核病的诊断 | 第24-27页 |
| 1.5 TRIM蛋白家族概述 | 第27-33页 |
| 1.6 本课题的研究目的及意义 | 第33-34页 |
| 第二章 宿主感染结核菌后TRIM蛋白家族的表达变化 | 第34-52页 |
| 引言 | 第34页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 人静脉外周血 | 第34页 |
| 2.1.2 实验相关试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.2.1 伦理学论证 | 第35-36页 |
| 2.2.2 受试人群的入组 | 第36页 |
| 2.2.3 基本信息采集 | 第36页 |
| 2.2.4 样本采集及处理方法 | 第36-37页 |
| 2.2.5 RNA的提取 | 第37页 |
| 2.2.6 总RNA质量鉴定及定量 | 第37页 |
| 2.2.7 反转录cDNA的合成 | 第37-38页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR检测宿主TRIM基因的表达水平 | 第38-39页 |
| 2.2.9 筛选差异表达的TRIM基因及生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-50页 |
| 2.3.1 研究对象 | 第40-41页 |
| 2.3.2 受试者外周血提取RNA | 第41-42页 |
| 2.3.3 荧光定量PCR筛选差异表达的TRIM基因 | 第42-48页 |
| 2.3.4 差异表达的TRIM基因相互作用网络分析 | 第48-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-51页 |
| 2.5 结论 | 第51-52页 |
| 第三章 体外细胞感染验证TRIM基因的表达变化及初步研究TRIM65基因在抗结核感染中的作用 | 第52-94页 |
| 引言 | 第52页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-56页 |
| 3.1.1 细胞 | 第52页 |
| 3.1.2 菌株和质粒 | 第52-53页 |
| 3.1.3 实验相关试剂 | 第53-54页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第54-55页 |
| 3.1.5 主要仪器设备 | 第55-56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-73页 |
| 3.2.1 THP-1细胞培养 | 第56-58页 |
| 3.2.2 RAW264.7细胞培养 | 第58-59页 |
| 3.2.3 耻垢分枝杆菌和结核分枝杆菌H37Rv的培养 | 第59-60页 |
| 3.2.4 THP-1巨噬细胞感染M.sm后的吞噬率及在胞内存活情况 | 第60-61页 |
| 3.2.5 建立M.sm感染THP-1和RAW264.7细胞的感染模型 | 第61-62页 |
| 3.2.6 细胞RNA的提取及反转录 | 第62页 |
| 3.2.7 细胞总蛋白的提取 | 第62页 |
| 3.2.8 BCA测蛋白浓度 | 第62-63页 |
| 3.2.9 检测体外细胞系感染M.sm后TRIM基因的表达变化 | 第63-67页 |
| 3.2.10 鼠源TRIM65基因过表达载体的构建 | 第67-73页 |
| 3.2.11 统计分析 | 第73页 |
| 3.3 实验结果 | 第73-91页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第73-75页 |
| 3.3.2 THP-1巨噬细胞感染M.sm后的吞噬情况 | 第75页 |
| 3.3.3 M.sm在THP-1巨噬细胞内的存活情况 | 第75-76页 |
| 3.3.4 细胞感染M.sm后TRIM基因的表达变化 | 第76-82页 |
| 3.3.5 鼠源TRIM65基因过表达载体构建 | 第82-86页 |
| 3.3.6 RAW264.7细胞转染pEGFP-N1-TRIM65的结果 | 第86-87页 |
| 3.3.7 RAW264.7高表达TRIM65对抗M.sm感染的其他相关基因的影响. | 第87-89页 |
| 3.3.8 RAW264.7高表达TRIM65对抗Mtb感染的其他相关基因的影响 | 第89-91页 |
| 3.4 讨论 | 第91-92页 |
| 3.5 结论 | 第92-94页 |
| 第四章 TRIM基因作为潜在标志物用以诊断Mtb感染的研究 | 第94-110页 |
| 引言 | 第94-95页 |
| 4.1 实验材料 | 第95页 |
| 4.2 实验方法 | 第95-97页 |
| 4.2.1 研究对象 | 第95页 |
| 4.2.2 RNA的提取 | 第95页 |
| 4.2.3 反转录cDNA的合成 | 第95页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR检测TRIM基因的mRNA表达量 | 第95-96页 |
| 4.2.5 受试者操作曲线分析诊断效果 | 第96页 |
| 4.2.6 TRIM基因联合区分潜伏感染和健康对照 | 第96-97页 |
| 4.2.7 统计学分析 | 第97页 |
| 4.3 实验结果 | 第97-107页 |
| 4.3.1 研究对象 | 第97-98页 |
| 4.3.2 荧光定量PCR检测TRIM基因的表达 | 第98-100页 |
| 4.3.3 TRIM基因作为标志物鉴别Mtb的感染状态 | 第100-104页 |
| 4.3.4 TRIM基因联合鉴别诊断潜伏感染和健康对照 | 第104-107页 |
| 4.4 讨论 | 第107-109页 |
| 4.5 结论 | 第109-110页 |
| 第五章 鉴别活动性结核病的血清标志物的筛选及初步验证 | 第110-131页 |
| 引言 | 第110-111页 |
| 5.1 实验材料 | 第111-112页 |
| 5.1.1 血清样本 | 第111页 |
| 5.1.2 实验相关试剂 | 第111页 |
| 5.1.3 主要溶液配制 | 第111-112页 |
| 5.1.4 主要仪器设备 | 第112页 |
| 5.2 实验方法 | 第112-117页 |
| 5.2.1 伦理学论证 | 第112-113页 |
| 5.2.2 本课题的研究对象 | 第113页 |
| 5.2.3 结核分枝杆菌蛋白芯片筛选血清标志物 | 第113-115页 |
| 5.2.4 ELISA验证潜在血清标志物 | 第115-116页 |
| 5.2.5 受试者操作曲线分析候选标志物诊断效果 | 第116页 |
| 5.2.6 二元逻辑回归分析 | 第116-117页 |
| 5.2.7 统计学分析 | 第117页 |
| 5.3 实验结果 | 第117-128页 |
| 5.3.1 研究对象 | 第117-118页 |
| 5.3.2 芯片筛选抗体差异响应的抗原 | 第118-121页 |
| 5.3.3 ELISA验证Rv2026c和Rv2421c特异性抗体水平 | 第121-122页 |
| 5.3.4 Rv2026c和Rv2421c作为标志物鉴别活动性结核病 | 第122-125页 |
| 5.3.5 抗体响应程度与临床背景的关联分析 | 第125-128页 |
| 5.4 讨论 | 第128-129页 |
| 5.5 结论 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-144页 |
| 文献综述 | 第144-161页 |
| 参考文献 | 第152-161页 |
| 附录 | 第161-167页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第167-168页 |
| 致谢 | 第168-169页 |
| 个人简历 | 第169-170页 |
