摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-21页 |
1 课题的提出 | 第9-10页 |
2 剔除标记基因的研究进展 | 第10-15页 |
·标记基因的分离剔除法 | 第10-11页 |
·标记基因的重组剔除法 | 第11-13页 |
·转座子系统 | 第11-12页 |
·同源重组 | 第12-13页 |
·位点特异性重组系统 | 第13页 |
·Cre/LoxP系统剔除标记基因的发展过程 | 第13-15页 |
·简单剔除阶段 | 第14页 |
·控制剔除阶段 | 第14-15页 |
·高效剔除阶段 | 第15页 |
3 柑橘溃疡病研究进展 | 第15-20页 |
·柑橘溃疡病抗性研究进展 | 第15-17页 |
·不同柑橘种类或品种对溃疡病的抗性 | 第15-16页 |
·柑橘表皮细胞与柑橘溃疡病抗性的研究 | 第16-17页 |
·寄主抗病性与其组织结构及生理生化特性 | 第17页 |
·柑橘溃疡病防治措施的研究现状 | 第17-19页 |
·严格病害检疫措施 | 第18页 |
·化学防治 | 第18页 |
·生物防治 | 第18-19页 |
·抗病基因工程研究进展 | 第19-20页 |
4 开展本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 柑橘无标记转基因转化体系的建立 | 第21-32页 |
1 材料与方法 | 第21-25页 |
·材料 | 第21-22页 |
·试验方法 | 第22-25页 |
·材料准备 | 第22页 |
·外植体转化 | 第22-23页 |
·化学诱导剂诱导 | 第23页 |
·诱导抗性芽的嫁接 | 第23页 |
·对照设置 | 第23页 |
·转基因植株的检测 | 第23-25页 |
2 结果与分析 | 第25-30页 |
·转化诱导条件对诱导抗性芽生长的影响 | 第25-28页 |
·抗性芽诱导时长度对其生长的影响 | 第25页 |
·6-BA的浓度对诱导抗性芽生长的影响 | 第25-28页 |
·β-雌二醇的浓度对诱导抗性芽生长的影响 | 第28页 |
·标记基因剔除的分析 | 第28-30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
第三章 柑橘溃疡病致病基因pthA-NLS无标记载体的构建 | 第32-41页 |
1 材料与方法 | 第32-38页 |
·材料 | 第32-33页 |
·无标记载体的构建 | 第33-37页 |
·质粒小量提取方法 | 第33-35页 |
·回收纯化 | 第35页 |
·去磷酸化 | 第35-36页 |
·外源DNA片段在质粒载体中的克隆 | 第36-37页 |
·p35S-NLS转化农杆菌 | 第37-38页 |
2 结果与分析 | 第38-39页 |
·克隆载体pGM-NLS的获得 | 第38页 |
·植物表达载体p35S-NLS的获得 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
第四章 无标记载体对大红甜橙的转化 | 第41-53页 |
1 材料与方法 | 第41-45页 |
·材料 | 第41-42页 |
·植物表达载体与植物材料 | 第41页 |
·试剂与仪器 | 第41-42页 |
·主要培养基配方 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-45页 |
·农杆菌菌液的准备 | 第42页 |
·植物材料准备 | 第42-43页 |
·外植体的转化 | 第43页 |
·化学诱导剂诱导 | 第43页 |
·诱导抗性芽的嫁接 | 第43页 |
·对照设置 | 第43页 |
·转基因植株的分析检测 | 第43-45页 |
2 结果与分析 | 第45-50页 |
·转pthA-NLS基因大红甜橙的获得 | 第45-47页 |
·抗性芽的再生 | 第45页 |
·诱导抗性芽的嫁接 | 第45-47页 |
·诱导抗性芽的生根 | 第47页 |
·转基因植株的检测结果 | 第47-50页 |
·转基因苗的PCR检测结果与分析 | 第47-49页 |
·转基因苗的RT-PCR检测结果与分析 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
第五章 全文总结与展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
附表 缩略词表 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |