摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一部分 miR-140在Bel-7402肝癌细胞中对Nrf2及其下游抗氧化基因表达的影响 | 第10-36页 |
第1章 绪论 | 第11-23页 |
1.1 课题的背景及研究的目的和意义 | 第11页 |
1.2 Keap1-Nrf2-ARE的相关研究进展 | 第11-17页 |
1.2.1 Keap1-Nrf2-ARE信号通路的基本结构 | 第11-13页 |
1.2.2 Keap1-Nrf2-ARE信号通路的激活 | 第13-16页 |
1.2.3 Keap1-Nrf2-ARE信号通路在癌症中的双重作用 | 第16-17页 |
1.3 miRNA的相关研究进展 | 第17-23页 |
1.3.1 miRNA的基因定位 | 第18页 |
1.3.2 miRNA的生物合成 | 第18-19页 |
1.3.3 miRNA的作用机制与功能 | 第19页 |
1.3.4 miRNAs对肿瘤的双重作用 | 第19-22页 |
1.3.5 miR-140的研究进展 | 第22-23页 |
第2章 材料与方法 | 第23-29页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第23页 |
2.2.2 构建过表达miR-140的慢病毒 | 第23页 |
2.2.3 筛选过表达miR-140的Bel-7402肝癌细胞系 | 第23页 |
2.2.4 荧光定量PCR检测相关基因的表达 | 第23-26页 |
2.2.5 蛋白提取以及Western blot分析 | 第26-27页 |
2.2.6 MTS检测细胞增殖 | 第27页 |
2.2.7 划痕实验检测细胞迁移率 | 第27-28页 |
2.2.8 流式细胞仪检测细胞周期 | 第28页 |
2.2.9 统计学分析 | 第28-29页 |
第3章 实验结果与讨论 | 第29-36页 |
3.1 构建能够稳定表达miR-140的肝癌细胞株Bel-7402 | 第29页 |
3.2 miR-140对Bel-7402肝癌细胞迁移的影响 | 第29-30页 |
3.3 miR-140抑制Bel-7402肝癌细胞周期中DNA的复制 | 第30-31页 |
3.4 miR-140抑制Bel-7402肝癌细胞的增殖 | 第31-32页 |
3.5 miR-140抑制Nrf2及其下游抗氧化基因的表达 | 第32-33页 |
3.6 miR-140增强Nrf2及其下游抗氧化基因在mRNA水平上对氧化应激的敏感性 | 第33页 |
3.7 miR-140抑制Nrf2在蛋白水平上对氧化应激的敏感性 | 第33-34页 |
3.8 miR-140增加Bel-7402肝癌细胞对氧化应激的敏感性 | 第34-35页 |
3.9 讨论 | 第35-36页 |
第二部分 PQQ在肝癌细胞中对氧化应激影响的初步研究 | 第36-58页 |
第1章 绪论 | 第37-47页 |
1.1 课题的背景及研究的目的和意义 | 第37页 |
1.2 氧化应激的相关研究进展 | 第37-42页 |
1.2.1 自由基的种类和来源 | 第37-38页 |
1.2.2 氧化应激的机制 | 第38-40页 |
1.2.3 氧化应激与癌症 | 第40-42页 |
1.3 抗氧化剂和促氧化剂 | 第42-47页 |
1.3.1 抗氧化系统 | 第42-44页 |
1.3.2 促氧化系统 | 第44-45页 |
1.3.3 PQQ的相关研究进展 | 第45-47页 |
第2章 材料与方法 | 第47-52页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第47页 |
2.2 实验方法 | 第47-52页 |
2.2.1 细胞培养 | 第47页 |
2.2.2 MTS检测细胞增殖 | 第47页 |
2.2.3 显微镜下观察细胞生活力 | 第47页 |
2.2.4 RNA提取以及Q-PCR分析 | 第47-50页 |
2.2.5 细胞凋亡的检测 | 第50页 |
2.2.6 统计学分析 | 第50-52页 |
第3章 实验结果与讨论 | 第52-58页 |
3.1 PQQ对肝癌细胞生长的影响 | 第52-53页 |
3.2 QPCR检测SMMC-7721细胞抗氧化基因的表达量 | 第53-54页 |
3.3 PQQ促进SMMC-7721细胞的凋亡 | 第54-55页 |
3.4 在化疗药物作用下PQQ对肝癌细胞生长的影响 | 第55-56页 |
3.5 讨论 | 第56-58页 |
全文总结 | 第58-59页 |
附录 | 第59-65页 |
附录A 英文缩写词表 | 第59-60页 |
附录B 主要溶液配制 | 第60-64页 |
附录C 实验室主要仪器设备 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-79页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |