| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 缩略语对照表 | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 宫颈癌耐药概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 宫颈癌简介 | 第9页 |
| 1.1.2 宫颈癌的治疗 | 第9-10页 |
| 1.2 顺铂概述 | 第10-12页 |
| 1.3 个体化用药的概述 | 第12页 |
| 1.4 转录组测序概述 | 第12-13页 |
| 1.5 PI3K/AKT信号通路概述 | 第13-15页 |
| 1.6 MK-22062HCl简介 | 第15-16页 |
| 1.7 研究内容及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 实验材料及方法 | 第17-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 宫颈癌细胞株 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 实验耗材 | 第18-19页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第19页 |
| 2.1.5 常用缓冲液的配制 | 第19-22页 |
| 2.2 细胞实验 | 第22-24页 |
| 2.2.1 传代培养 | 第23页 |
| 2.2.2 细胞换液 | 第23页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第23-24页 |
| 2.2.4 细胞复苏 | 第24页 |
| 2.3 耐药株构建 | 第24-25页 |
| 2.4 细胞毒性实验 | 第25-26页 |
| 2.5 转录组测序与分析 | 第26-28页 |
| 2.6 PCR实验验证转录组测序结果 | 第28-31页 |
| 2.6.1 Trizol法提取RNA | 第28页 |
| 2.6.2 反转录 | 第28-29页 |
| 2.6.3 qRT-PCR实验 | 第29-31页 |
| 2.7 siRNA合成及细胞转染实验 | 第31-32页 |
| 2.8 蛋白免疫印迹实验 | 第32-33页 |
| 2.9 细胞凋亡检测实验 | 第33-35页 |
| 第三章 实验结果 | 第35-47页 |
| 3.1 宫颈癌顺铂耐药株模型建立 | 第35-36页 |
| 3.2 转录组测序结果分析 | 第36-37页 |
| 3.3 DEGs的功能聚类分析 | 第37-41页 |
| 3.4 PCR验证转录组测序结果 | 第41-42页 |
| 3.5 AKT3在顺铂耐药中的功能 | 第42-47页 |
| 3.5.1 AKT3-siRNA和MK-2206抑制AKT3表达 | 第42-44页 |
| 3.5.2 AKT3-siRNA、MK-2206增加Hela/DDP对顺铂的敏感性 | 第44-45页 |
| 3.5.3 AKT3-siRNA诱导细胞凋亡 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-51页 |
| 4.1 转录组测序样本选择的局限性 | 第47页 |
| 4.2 PI3K/AKT信号通路与宫颈癌顺铂耐药之间的关系 | 第47-49页 |
| 4.3 宫颈癌细胞对顺铂耐药的其他通路研究 | 第49-50页 |
| 4.4 顺铂耐药性与细胞凋亡之间的关联 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
