| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 第一章 材料及方法 | 第12-25页 |
| 1.1 实验材料 | 第12-15页 |
| 1.1.1 研究对象 | 第12页 |
| 1.1.2 细胞来源 | 第12页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第12-14页 |
| 1.1.4 主要器材、仪器 | 第14-15页 |
| 1.2 实验方法 | 第15-25页 |
| 1.2.1 免疫组化染色 | 第15-16页 |
| 1.2.1.1 石蜡切片的制作 | 第15页 |
| 1.2.1.2 免疫组化SP法 | 第15-16页 |
| 1.2.1.3 结果分析与判断 | 第16页 |
| 1.2.2 细胞培养 | 第16-18页 |
| 1.2.2.1 细胞复苏 | 第16-17页 |
| 1.2.2.2 细胞培养 | 第17页 |
| 1.2.2.3 细胞传代 | 第17页 |
| 1.2.2.4 细胞冻存 | 第17-18页 |
| 1.2.3 实验分组及siRNA转染 | 第18页 |
| 1.2.3.1 实验分组 | 第18页 |
| 1.2.3.2 siRNA转染 | 第18页 |
| 1.2.4 RT-PCR方法检测实验组和对照组T24细胞内Gli-2 的mRNA表达 | 第18-20页 |
| 1.2.4.1 膀胱癌T24细胞总RNA提取 | 第18-19页 |
| 1.2.4.2 逆转录 | 第19-20页 |
| 1.2.4.3 Gli-2 编码序列引物的设计 | 第20页 |
| 1.2.4.4 Real time PCR扩增Gli-2 编码序列 | 第20页 |
| 1.2.5 Western-blot方法分析Gli-2，VEGF和MMP-9 蛋白的表达 | 第20-23页 |
| 1.2.5.1 细胞蛋白样品的制备 | 第21页 |
| 1.2.5.2 蛋白浓度的测定 | 第21页 |
| 1.2.5.3 Western blot检测蛋白表达 | 第21-23页 |
| 1.2.6 CCK-8 法检测T24细胞增殖情况 | 第23页 |
| 1.2.7 细胞周期和凋亡的检测 | 第23-24页 |
| 1.2.8 统计分析 | 第24-25页 |
| 第二章 实验结果 | 第25-34页 |
| 2.1 免疫组化检测结果 | 第25-27页 |
| 2.2 Gli-2 膀胱癌细胞株中的表达及意义 | 第27-28页 |
| 2.3 . 小干扰 RNA 沉默 Gli-2 基因效果的验证 | 第28-29页 |
| 2.4 实验组和对照组 T24 细胞内 Gli-2 的 m RNA 表达情况 | 第29-30页 |
| 2.5 实验组和对照组 T24 细胞中 Gli-2，VEGF 和 MMP-9 蛋白的表达情况 | 第30-31页 |
| 2.6 实验组和对照组膀胱癌 T24 细胞的增殖情况 | 第31-32页 |
| 2.7 Gli-2 基因表达下调对膀胱癌 T24 细胞的细胞周期和凋亡的影响 | 第32-34页 |
| 第三章 讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 综述 | 第40-51页 |
| 综述的参考文献 | 第46-51页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
