| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 哺乳动物性发育研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 性发育过程中的神经内分泌 | 第11-12页 |
| 1.1.2 性发育过程中的相关基因 | 第12-13页 |
| 1.1.3 小鼠性发育过程中的性状 | 第13-14页 |
| 1.2 立题背景 | 第14-16页 |
| 1.2.1 本实验室 QTL 定位进展 | 第14页 |
| 1.2.2 miR – 505 研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 miRNA 过表达载体 | 第15页 |
| 1.2.4 原位杂交 | 第15-16页 |
| 1.3 实验研究内容 | 第16-18页 |
| 1.4 实验研究意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 实验群体 | 第19页 |
| 2.1.2 实验仪器及试剂 | 第19-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-36页 |
| 2.2.1 小鼠饲养 | 第22-23页 |
| 2.2.2 原位注射 | 第23-24页 |
| 2.2.3 制作冰冻切片 | 第24-26页 |
| 2.2.4 总 RNA 抽提及定量 | 第26-27页 |
| 2.2.5 实时荧光定量 PCR | 第27-30页 |
| 2.2.6 卵巢 HE 染色观察 | 第30页 |
| 2.2.7 生殖表型观察 | 第30-31页 |
| 2.2.8 ELISA 检测激素含量 | 第31-34页 |
| 2.2.9 原位杂交 | 第34-36页 |
| 2.3 数据分析 | 第36-38页 |
| 2.3.1 基于 RT-PCR 的基因相对表达量分析 | 第36-37页 |
| 2.3.2 ELISA 数据处理 | 第37页 |
| 2.3.3 性发育表型数据处理 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-55页 |
| 3.1 动物模型构建的验证 | 第38-40页 |
| 3.1.1 RT-PCR 检测 miR-505 含量变化 | 第38-39页 |
| 3.1.2 原位杂交方法示踪 miR-505 | 第39-40页 |
| 3.2 性发育表型的观测 | 第40-45页 |
| 3.2.1 各组小鼠注射后体重增长的监测 | 第40-41页 |
| 3.2.2 各组小鼠注射后阴门开启时间的监测 | 第41-42页 |
| 3.2.3 各组小鼠合笼到子鼠出生时间的监测 | 第42-43页 |
| 3.2.4 各组小鼠子鼠出生及死亡的监测 | 第43-44页 |
| 3.2.5 各组小鼠怀孕情况的监测 | 第44-45页 |
| 3.3 卵巢发育相关表型检测 | 第45-49页 |
| 3.3.1 各级卵泡的组织学形态观察 | 第45-46页 |
| 3.3.2 各组小鼠卵巢组织学形态观察 | 第46-49页 |
| 3.4 各组小鼠模型中相关雌激素水平的检测 | 第49-52页 |
| 3.4.1 各组小鼠促黄体生成激素含量测定 | 第49-50页 |
| 3.4.2 各组小鼠促性腺激素释放激素含量测定 | 第50-52页 |
| 3.5 不同注射位置对小鼠表型的影响 | 第52-55页 |
| 3.5.1 子鼠减少小鼠的原位杂交 | 第52-53页 |
| 3.5.2 不育小鼠的原位杂交 | 第53-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-59页 |
| 4.1 慢病毒载体的定点注射 | 第55-56页 |
| 4.2 目的基因相对表达水平测定 | 第56页 |
| 4.3 原位杂交技术 | 第56-59页 |
| 第五章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 课题来源 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文目录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |