| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词及英汉对照表 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1.1 Argonaute(AGO)蛋白研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 AGO蛋白的起源和简介 | 第13页 |
| 1.1.2 AGO蛋白与sRNA在RNA沉默中的作用 | 第13-15页 |
| 1.1.3 AGO蛋白在植物中的研究状况 | 第15-16页 |
| 1.1.4 AGO蛋白在细胞的定位研究 | 第16页 |
| 1.1.5 AGO蛋白与CMV2b蛋白互作机制 | 第16-17页 |
| 1.1.6 酵母双杂交技术在植物与病毒互作研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 本课题的研究内容 | 第18-19页 |
| 1.3 本课题研究技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 SlAGO4B基因克隆及序列信息分析 | 第20-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 实验载体 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 SlAGO4B基因TA克隆 | 第20-23页 |
| 2.2.2 SlAGO4B序列信息分析 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-27页 |
| 2.3.1 SlAGO4B基因TA克隆 | 第24页 |
| 2.3.2 SlAGO4B序列信息分析 | 第24-27页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 利用酵母双杂交技术验证SlAGO4B与CMV 2b相互作用 | 第28-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.1 菌株和质粒载体 | 第28页 |
| 3.1.2 常用试剂及试剂盒 | 第28页 |
| 3.1.3 常用试剂及培养基的配制 | 第28页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1 目的载体的构建 | 第28-29页 |
| 3.2.2 蛋白相互作用验证 | 第29-30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-33页 |
| 3.3.1 pGAD-Sl4B(AD-4B)载体构建 | 第30-31页 |
| 3.3.2 AD-4B与BD-2b的互作验证 | 第31-33页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 加工番茄SlAGO4B基因的亚细胞定位 | 第34-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 4.1.1 实验菌株和实验材料 | 第34页 |
| 4.1.2 实验载体 | 第34页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 4.2.1 目的载体的构建 | 第35页 |
| 4.2.2 农杆菌的遗传转化 | 第35-37页 |
| 4.2.3 再生植株的鉴定 | 第37页 |
| 4.2.4 转基因植株的PCR检测 | 第37-38页 |
| 4.2.5 转基因烟草原生质体的制备 | 第38页 |
| 4.2.6 农杆菌瞬时转化 | 第38-39页 |
| 4.3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 4.3.1 35 S:GFP-SlAGO4B载体构建 | 第39页 |
| 4.3.2 35 S:GFP-SlAGO4B遗传转化 | 第39-40页 |
| 4.3.3 SlAGO4B亚细胞定位 | 第40-42页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 SlAGO4B基因过量表达构建及遗传转化 | 第43-49页 |
| 5.1 实验材料 | 第43页 |
| 5.1.1 实验菌株和材料 | 第43页 |
| 5.1.2 实验载体 | 第43页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 5.2.1 过表达载体35S:SlAGO4B的构建 | 第43-44页 |
| 5.2.2 过表达载体35S:SlAGO4B遗传转化 | 第44-45页 |
| 5.2.3 再生植株的鉴定 | 第45-46页 |
| 5.3 结果与分析 | 第46-48页 |
| 5.3.1 表达载体构建 | 第46-47页 |
| 5.3.2 加工番茄遗传转化 | 第47-48页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第六章 结论与展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录常用试剂及培养基的配制 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
