| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第一章 引言 | 第9-11页 |
| 第二章 转ie2基因小鼠的构建和鉴定 | 第11-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第11-13页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第11页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第11页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第11页 |
| 2.1.4 实验中主要溶液的配制 | 第11-12页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第12-13页 |
| 2.2 实验方法 | 第13-22页 |
| 2.2.1 重组质粒pAV.ExBi-CMV-IE2-IRES-eGFP的构建 | 第13页 |
| 2.2.2 重组质粒pAV.ExBi-CMV-IE2-IRES-eGFP的鉴定 | 第13页 |
| 2.2.3 运用显微注射法制备转基因首建鼠 | 第13-14页 |
| 2.2.4 转基因鼠的PCR鉴定 | 第14-16页 |
| 2.2.5 首建鼠拷贝数的检测 | 第16-18页 |
| 2.2.6 ie2转基因子代鼠的鉴定、筛选和纯化 | 第18-21页 |
| 2.2.7 转基因鼠纯化策略 | 第21页 |
| 2.2.8 统计学方法 | 第21-22页 |
| 2.3 结果 | 第22-31页 |
| 2.3.1 pAV.ExBi-CMV-IE2-IRES-eGFP表达载体的构建与鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3.2 F0代小鼠的PCR法鉴定 | 第23-25页 |
| 2.3.3 子代转基因小鼠的PCR鉴定和阳性率统计 | 第25-26页 |
| 2.3.4 转基因小鼠拷贝数检测标准曲线的制作 | 第26-27页 |
| 2.3.5 F0代转基因小鼠拷贝数的检测结果 | 第27页 |
| 2.3.6 F1代转基因小鼠的表达检测 | 第27-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 转基因小鼠免疫指标的检测 | 第33-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 外周血采集 | 第33页 |
| 3.2.2 裂解红细胞处理过程 | 第33页 |
| 3.2.3 免疫荧光染色和流式细胞技术检测 | 第33-34页 |
| 3.2.4 半定量RT-PCR检测小鼠脾脏细胞因子mRNA的表达情况 | 第34-35页 |
| 3.2.5 统计学方法 | 第35-36页 |
| 3.3 结果 | 第36-41页 |
| 3.3.1 实验设计和流式细胞术的门控方案 | 第36-37页 |
| 3.3.2 外周血CD4~+CD25~+调节T细胞占淋巴细胞比例 | 第37-38页 |
| 3.3.3 转基因小鼠脾指数的检测 | 第38-39页 |
| 3.3.4 小鼠脾脏中IL-2、IFN-γ、IL-6、TGF-β1、Foxp3的表达检测 | 第39-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 综述 | 第50-61页 |
| 综述参考文献 | 第56-61页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第61-62页 |
| 缩略词表(附录) | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
