| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 研究背景与意义 | 第10-11页 |
| 1.2 启动子的研究进展 | 第11页 |
| 1.3 启动子的基本结构及特征 | 第11-12页 |
| 1.3.1 启动子的结构 | 第11-12页 |
| 1.3.2 启动子的特征 | 第12页 |
| 1.4 启动子的类型 | 第12-17页 |
| 1.4.1 组成型启动子 | 第12-13页 |
| 1.4.2 诱导型启动子 | 第13-15页 |
| 1.4.3 组织特异性启动子 | 第15-17页 |
| 1.5 技术路线图 | 第17页 |
| 1.6 本研究的主要内容 | 第17-18页 |
| 2 实验材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第18-20页 |
| 2.1.5 实验所用引物 | 第20页 |
| 2.2 兴安落叶松LgUGPase基因启动子的分离 | 第20-25页 |
| 2.2.1 兴安落叶松基因组DNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 TAIL-PCR技术原理 | 第21-22页 |
| 2.2.3 特异性引物设计 | 第22页 |
| 2.2.4 TAIL-PCR反应 | 第22-24页 |
| 2.2.5 LgUGPase基因启动子全长序列扩增 | 第24页 |
| 2.2.6 PCR产物回收及TA克隆连接与转化 | 第24页 |
| 2.2.7 重组质粒鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.8 LgUGPase基因启动子区域的分析和功能预测 | 第25页 |
| 2.3 兴安落叶松LgUGPase基因启动子植物表达载体构建 | 第25-27页 |
| 2.3.1 设计重组引物克隆目的片段 | 第25-26页 |
| 2.3.2 pORE-R1载体的酶切 | 第26页 |
| 2.3.3 LgUGPase基因启动子片段和pORE-R1载体的连接反应 | 第26-27页 |
| 2.3.4 pLgUGPase::GUS重组载体的鉴定 | 第27页 |
| 2.3.5 pORER1-pLgUGPase::GUS重组质粒的酶切鉴定 | 第27页 |
| 2.4 兴安落叶松LgUGPase基因启动子转化拟南芥 | 第27-31页 |
| 2.4.1 pORER1-pLgUGPase::GUS重组质粒转化农杆菌 | 第27-28页 |
| 2.4.2 农杆菌转化拟南芥 | 第28页 |
| 2.4.3 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第28-30页 |
| 2.4.4 转基因拟南芥的GUS染色 | 第30-31页 |
| 3 实验结果与分析 | 第31-41页 |
| 3.1 兴安落叶松总DNA的提取 | 第31页 |
| 3.2 兴安落叶松LgUGPase启动子的克隆 | 第31-32页 |
| 3.3 兴安落叶松LgUGPase基因启动子结果与序列分析 | 第32-35页 |
| 3.4 植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.5 农杆菌的转化及鉴定 | 第36-37页 |
| 3.6 拟南芥的遗传转化及鉴定 | 第37-38页 |
| 3.7 转基因拟南芥的GUS组织化学染色检测 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 4.1 UGPase基因的表达特性分析 | 第41页 |
| 4.2 LgUGPase基因启动子序列分析及功能验证 | 第41-42页 |
| 4.3 LgUGPase基因启动子的用途 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
