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冬凌草甲素抑制NLRP3炎症小体并缓解相关疾病的作用及机制探究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第1章 绪论第12-38页
    1.1 固有免疫与模式识别受体第12-14页
    1.2 NOD样受体第14-17页
        1.2.1 NOD样受体的结构与分类第14-16页
        1.2.2 NOD样受体的功能第16页
        1.2.3 NOD样受体与疾病第16-17页
    1.3 炎症小体第17-21页
        1.3.1 NLRP1炎症小体第18-19页
        1.3.2 NLRC4炎症小体第19页
        1.3.3 AIM2炎症小体第19-20页
        1.3.4 Pyrin炎症小体第20页
        1.3.5 NLRP3炎症小体第20-21页
    1.4 NLRP3炎症小体第21-32页
        1.4.1 NLRP3炎症小体的结构与组装第21-22页
        1.4.2 NLRP3炎症小体的活化与调控第22-26页
        1.4.3 NLRP3炎症小体相关的疾病第26-29页
        1.4.4 NLRP3炎症小体抑制剂第29-32页
    1.5 冬凌草与冬凌草甲素第32-38页
        1.5.1 冬凌草甲素与癌症第33-35页
        1.5.2 冬凌草甲素与炎症第35-38页
第2章 实验材料与方法第38-60页
    2.1 实验材料第38-43页
        2.1.1 实验小鼠第38页
        2.1.2 细胞系第38页
        2.1.3 质粒第38-39页
        2.1.4 质粒构建用引物第39-40页
        2.1.5 实验用抗体第40页
        2.1.6 实验试剂第40-42页
        2.1.7 实验耗材第42页
        2.1.8 实验仪器第42-43页
    2.2 实验相关试剂的配制第43-45页
        2.2.1 WB(Western Blotting)相关缓冲液第43-44页
        2.2.2 PBS缓冲液第44页
        2.2.3 转染试剂PEI的配制第44-45页
        2.2.4 细菌培养相关培养基的配制第45页
    2.3 实验方法第45-60页
        2.3.1 细胞冻存第45页
        2.3.2 细胞复苏第45-46页
        2.3.3 细胞培养第46页
        2.3.4 M-CSF的获取第46页
        2.3.5 小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs )的分离与培养第46-47页
        2.3.6 人外周单核细胞(PBMCs )的分离第47页
        2.3.7 炎症小体刺激第47-48页
        2.3.8 免疫共沉淀(IP)第48-49页
        2.3.9 Pull down实验(PD)第49页
        2.3.10 Bio-Ori结合蛋白检测第49-50页
        2.3.11 质粒构建第50-52页
        2.3.12 质粒抽提第52页
        2.3.13 蛋白纯化第52-53页
        2.3.14 MST实验第53页
        2.3.15 蛋白质免疫印迹(WB)第53-54页
        2.3.16 酶联免疫吸附反应(ELISA)第54页
        2.3.17 线粒体以及线粒体活性氧染色第54-55页
        2.3.18 ASC聚合实验第55页
        2.3.19 钾离子检测第55页
        2.3.20 氯离子检测第55-56页
        2.3.21 ATP酶活性检测第56页
        2.3.22 NLRP3回补实验第56页
        2.3.23 MSU诱导的小鼠腹膜炎第56-57页
        2.3.24 MSU诱导的小鼠关节炎第57页
        2.3.25 高脂食物诱导的肥胖模型建立与冬凌草甲素治疗第57-58页
        2.3.26 葡萄糖耐量试验第58页
        2.3.27 胰岛素耐量试验第58页
        2.3.28 统计学显著性分析第58-60页
第3章 实验结果第60-88页
    3.1 引言第60-61页
    3.2 实验结果第61-85页
        3.2.1 Ori特异性抑制NLRP3炎症小体活化第61-67页
        3.2.2 Ori影响NLRP3炎症小体组装第67-72页
        3.2.3 Ori直接与NLRP3结合第72-75页
        3.2.4 Ori通过碳碳双键与NLRP3 279位半胱氨酸共价键结合第75-78页
        3.2.5 Ori在体内抑制NLRP3依赖的炎症第78-85页
    3.3 小结与讨论第85-88页
参考文献第88-106页
致谢第106-108页
攻读博士期间的主要研究成果第108页

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