摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第12-38页 |
1.1 固有免疫与模式识别受体 | 第12-14页 |
1.2 NOD样受体 | 第14-17页 |
1.2.1 NOD样受体的结构与分类 | 第14-16页 |
1.2.2 NOD样受体的功能 | 第16页 |
1.2.3 NOD样受体与疾病 | 第16-17页 |
1.3 炎症小体 | 第17-21页 |
1.3.1 NLRP1炎症小体 | 第18-19页 |
1.3.2 NLRC4炎症小体 | 第19页 |
1.3.3 AIM2炎症小体 | 第19-20页 |
1.3.4 Pyrin炎症小体 | 第20页 |
1.3.5 NLRP3炎症小体 | 第20-21页 |
1.4 NLRP3炎症小体 | 第21-32页 |
1.4.1 NLRP3炎症小体的结构与组装 | 第21-22页 |
1.4.2 NLRP3炎症小体的活化与调控 | 第22-26页 |
1.4.3 NLRP3炎症小体相关的疾病 | 第26-29页 |
1.4.4 NLRP3炎症小体抑制剂 | 第29-32页 |
1.5 冬凌草与冬凌草甲素 | 第32-38页 |
1.5.1 冬凌草甲素与癌症 | 第33-35页 |
1.5.2 冬凌草甲素与炎症 | 第35-38页 |
第2章 实验材料与方法 | 第38-60页 |
2.1 实验材料 | 第38-43页 |
2.1.1 实验小鼠 | 第38页 |
2.1.2 细胞系 | 第38页 |
2.1.3 质粒 | 第38-39页 |
2.1.4 质粒构建用引物 | 第39-40页 |
2.1.5 实验用抗体 | 第40页 |
2.1.6 实验试剂 | 第40-42页 |
2.1.7 实验耗材 | 第42页 |
2.1.8 实验仪器 | 第42-43页 |
2.2 实验相关试剂的配制 | 第43-45页 |
2.2.1 WB(Western Blotting)相关缓冲液 | 第43-44页 |
2.2.2 PBS缓冲液 | 第44页 |
2.2.3 转染试剂PEI的配制 | 第44-45页 |
2.2.4 细菌培养相关培养基的配制 | 第45页 |
2.3 实验方法 | 第45-60页 |
2.3.1 细胞冻存 | 第45页 |
2.3.2 细胞复苏 | 第45-46页 |
2.3.3 细胞培养 | 第46页 |
2.3.4 M-CSF的获取 | 第46页 |
2.3.5 小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs )的分离与培养 | 第46-47页 |
2.3.6 人外周单核细胞(PBMCs )的分离 | 第47页 |
2.3.7 炎症小体刺激 | 第47-48页 |
2.3.8 免疫共沉淀(IP) | 第48-49页 |
2.3.9 Pull down实验(PD) | 第49页 |
2.3.10 Bio-Ori结合蛋白检测 | 第49-50页 |
2.3.11 质粒构建 | 第50-52页 |
2.3.12 质粒抽提 | 第52页 |
2.3.13 蛋白纯化 | 第52-53页 |
2.3.14 MST实验 | 第53页 |
2.3.15 蛋白质免疫印迹(WB) | 第53-54页 |
2.3.16 酶联免疫吸附反应(ELISA) | 第54页 |
2.3.17 线粒体以及线粒体活性氧染色 | 第54-55页 |
2.3.18 ASC聚合实验 | 第55页 |
2.3.19 钾离子检测 | 第55页 |
2.3.20 氯离子检测 | 第55-56页 |
2.3.21 ATP酶活性检测 | 第56页 |
2.3.22 NLRP3回补实验 | 第56页 |
2.3.23 MSU诱导的小鼠腹膜炎 | 第56-57页 |
2.3.24 MSU诱导的小鼠关节炎 | 第57页 |
2.3.25 高脂食物诱导的肥胖模型建立与冬凌草甲素治疗 | 第57-58页 |
2.3.26 葡萄糖耐量试验 | 第58页 |
2.3.27 胰岛素耐量试验 | 第58页 |
2.3.28 统计学显著性分析 | 第58-60页 |
第3章 实验结果 | 第60-88页 |
3.1 引言 | 第60-61页 |
3.2 实验结果 | 第61-85页 |
3.2.1 Ori特异性抑制NLRP3炎症小体活化 | 第61-67页 |
3.2.2 Ori影响NLRP3炎症小体组装 | 第67-72页 |
3.2.3 Ori直接与NLRP3结合 | 第72-75页 |
3.2.4 Ori通过碳碳双键与NLRP3 279位半胱氨酸共价键结合 | 第75-78页 |
3.2.5 Ori在体内抑制NLRP3依赖的炎症 | 第78-85页 |
3.3 小结与讨论 | 第85-88页 |
参考文献 | 第88-106页 |
致谢 | 第106-108页 |
攻读博士期间的主要研究成果 | 第108页 |